[發(fā)明專利]一種用模式生物斑馬魚篩選抗肝損傷藥物的新方法無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201010170675.2 | 申請日： | 2010-05-13 |
| 公開（公告）號： | CN101810866A | 公開（公告）日： | 2010-08-25 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 彭蘊茹;韋英杰;丁永芳;羅宇慧;石磊 | 申請（專利權(quán)）人： | 江蘇省中醫(yī)藥研究院 |
| 主分類號： | A61K49/00 | 分類號： | A61K49/00;A61K33/00;A61P1/16 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 210028 江*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 模式 生物 斑馬 篩選 損傷 藥物 新方法 | ||
1.一種用模式生物斑馬魚篩選抗肝損傷藥物的新方法，其特征在于，包括以下步驟：
(1)取斑馬魚的成體魚放入盛有水的容器里，隨即分為正常對照組、空白對照組、受試藥物組，每組斑馬魚數(shù)量相等，空白對照組和受試藥物組加入四氯化碳，使四氯化碳的摩爾濃度為0.5～2mmol/L，正常對照組加入等量的溶媒，持續(xù)造模3～5天，即得急性肝損傷斑馬魚模型，備用；
(2)將受試藥物配成所需濃度，加入到受試藥物組的水溶液中，正常對照組和空白對照組加入等量的蒸餾水，給藥48小時至72小時后，將各組斑馬魚取出處死，取各組斑馬魚肝臟隨機分為2份，一份制成1％的肝組織勻漿，檢測勻漿中ALT、AST水平和總蛋白含量，并計算勻漿中每克蛋白的ALT、AST水平，另一份肝臟組織標(biāo)本經(jīng)濃度10％福爾馬林溶液固定，石蠟切片，H-E染色，光鏡下觀察各組斑馬魚肝組織的病理改變情況，進行病理分級評分，正常為1分，輕微脂肪變性為2分，中度病變?yōu)?分，脂肪變性嚴(yán)重者為4分，評價并篩選各組受試藥物的抗肝損傷活性。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用模式生物斑馬魚篩選抗肝損傷藥物的新方法，其特征在于，步驟(1)用四氯化碳造模時，四氯化碳的終摩爾濃度為1mmol/L。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用模式生物斑馬魚篩選抗肝損傷藥物的新方法，其特征在于，步驟(1)所用的四氯化碳加入二甲基亞砜助溶，二甲基亞砜在溶液中的終濃度為0～1％，正常對照組加入的溶媒為等量的二甲基亞砜。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用模式生物斑馬魚篩選抗肝損傷藥物的新方法，其特征在于，步驟(1)所述的造模時間為3天。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用模式生物斑馬魚篩選抗肝損傷藥物的新方法，其特征在于，步驟(2)中在給藥72小時后將各組斑馬魚取出處死取肝組織。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用模式生物斑馬魚篩選抗肝損傷藥物的新方法，其特征在于，步驟(2)采用全自動生化分析儀檢測各組斑馬魚肝臟組織勻漿中的ALT、AST水平。
7.根據(jù)權(quán)利要求1至6任一項所述的用模式生物斑馬魚篩選抗肝損傷藥物的新方法，其特征在于，步驟(2)所述的受試藥物為化學(xué)藥品、中藥、中藥復(fù)方、天然藥物或它們的組合物。
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