[發(fā)明專利]一種篤斯越桔根瘤試管內(nèi)直接誘導(dǎo)、快繁方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201010169092.8
• 申請日: 2010-05-12
• 公開（公告）號: CN101822219A
• 公開（公告）日: 2010-09-08
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 顧地周;馮穎;姜云天;朱俊義;高捍東;陳霞
• 申請（專利權(quán)）人: 通化師范學(xué)院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 通化旺維專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 22205
• 代理人: 王偉

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種植物繁殖，即篤斯越桔根瘤試管內(nèi)直接誘導(dǎo)、快繁方法。

背景技術(shù)

在現(xiàn)有技術(shù)中，篤斯越桔(Vaccinium?uliginosum?Linn.)，又稱篤斯、甸果、地果、龍果、訥日蘇(蒙古族語)。篤斯越桔是杜鵑花科越桔屬落葉小灌木，《吉林省野生動植物保護(hù)管理暫行條例》中定為省級一類重點(diǎn)保護(hù)植物。是野生觀賞植物和珍稀瀕危藥用植物，主要功能為清熱、收斂等。果可生食，酸甜可口，汁液豐富，做果酒、果醋、果醬、果汁及提取天然食用色素的原料，被國際糧農(nóng)組織定為五大健康食品之一。其分布區(qū)甚狹，長白山區(qū)數(shù)量非常稀少，僅在長白山國家級自然保護(hù)區(qū)內(nèi)有較大種群分布。野生產(chǎn)果量低，人工馴化栽培后生長勢弱，導(dǎo)致果的產(chǎn)量極低和品質(zhì)極差，開發(fā)和利用受到極大限制。

越桔根系沒有根毛，吸收能力比具有根毛的根系小得多，但自然條件下幾乎所有的越桔細(xì)根都有EM(Eriocdimyochrriaz，EM)內(nèi)生菌根真菌的寄生，從而克服了越桔由于沒有根毛而造成的對水分及營養(yǎng)的吸收困難，改善植株營養(yǎng)狀況，調(diào)節(jié)宿主的代謝活性，增強(qiáng)植株的抗逆性，提高越桔的產(chǎn)量，加快移栽苗成活速度，節(jié)約農(nóng)業(yè)生產(chǎn)成本，增加經(jīng)濟(jì)產(chǎn)量和效益。因而將越桔組培技術(shù)和菌根化技術(shù)相結(jié)合，生產(chǎn)生長勢旺、抗逆能力強(qiáng)的越桔苗木是一項很有經(jīng)濟(jì)價值的研究項目。在國外，新西蘭已經(jīng)將接種菌根真菌作為促進(jìn)越桔生長、提高肥料利用率、提高產(chǎn)量的一項有效措施。而在國內(nèi)EM真菌的分離和研究幾乎還是一片空白。要生產(chǎn)菌根化苗木的關(guān)鍵是選用適宜當(dāng)?shù)厣鷳B(tài)條件的優(yōu)良菌種用于接種，培育出優(yōu)質(zhì)的菌根化越桔種苗，在生產(chǎn)和應(yīng)用中將產(chǎn)生巨大的經(jīng)濟(jì)效益。

為了更好的開發(fā)利用這一極具經(jīng)濟(jì)價值的野生珍貴資源，利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)在成功完成叢生芽誘導(dǎo)和生根的基礎(chǔ)上，又以野生篤斯越桔根芽的嫩莖在試管內(nèi)開展了直接誘導(dǎo)根瘤的研究，旨在建立篤斯越桔根瘤苗快繁體系，為篤斯越桔增產(chǎn)和提高品質(zhì)提供基礎(chǔ)保障。同時，應(yīng)用均勻設(shè)計對篤斯越桔根瘤誘導(dǎo)培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，以期縮短培養(yǎng)基的摸索周期。目前，越桔屬植物根瘤的研究大多集中在根瘤菌的分離和鑒定方面，很少達(dá)到與植物的共建并利用于栽培生產(chǎn)。本研究開展的篤斯越桔試管內(nèi)根瘤直接誘導(dǎo)和含根瘤苗高效快繁的報道國內(nèi)外迄今未見。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是針對上述不足而提供一種技術(shù)可行的篤斯越桔根瘤試管內(nèi)直接誘導(dǎo)、快繁方法。

本發(fā)明的技術(shù)解決方案是：篤斯越桔根瘤試管內(nèi)直接誘導(dǎo)、快繁方法，其特征在于步驟如下：

(1)以篤斯越桔根部分蘗的嫩芽為外植體，對外植體進(jìn)行處理，其適合的嫩芽根瘤誘導(dǎo)的培養(yǎng)基為：1/4MS+IAA0.80mg·L^-1+IBA0.04mg·L^-1+GA₃0.15mg·L^-1，添加蔗糖10g·L^-1，瓊脂8.30g·L^-1，調(diào)節(jié)pH值為5.5。在溫度20℃±2℃，光照強(qiáng)度1?200lx條件下培養(yǎng)，光照周期14h·d^-1。

式中MS為1962年由Murashige和Skoog發(fā)明的一種常用培養(yǎng)基，IAA為吲哚乙酸，IBA為吲哚丁酸，GA₃為赤霉素。

(2)采用已產(chǎn)生根瘤的再生植株的莖節(jié)為材料在試管利用節(jié)增殖的方法進(jìn)行快繁，將含有根瘤的試管苗于根上部留1～2葉切下，并將切下的小枝條再切割成一葉一段轉(zhuǎn)接到上述嫩芽根瘤誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進(jìn)行同時腋芽萌發(fā)、生長及根瘤再生培養(yǎng)，以38d為一個繼代增殖周期，每瓶增殖倍數(shù)平均達(dá)70以上。

本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是：采用篤斯越桔根芽為試材進(jìn)行根瘤誘導(dǎo)，并在試管內(nèi)成功誘導(dǎo)出根瘤。含根瘤苗的快繁利用再生植株的莖節(jié)為材料，采取節(jié)增殖的方法，從而縮短了繼代增殖周期，提高了增殖倍數(shù)，方法簡捷，經(jīng)濟(jì)實用，可操作性強(qiáng)，達(dá)到了快繁的目標(biāo)，可用于含根瘤的篤斯越桔苗的工廠化育苗，且均在試管內(nèi)進(jìn)行，同時，應(yīng)用均勻設(shè)計處理、分析數(shù)據(jù)和再試驗大大縮短了培養(yǎng)基配方的摸索周期。篤斯越桔根瘤技術(shù)可為長白山區(qū)野生資源的開發(fā)利用和中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)化提供技術(shù)保障。

下面將結(jié)合附圖、實施例對本發(fā)明的實施方式作進(jìn)一步詳細(xì)描述。

附圖說明

圖1是篤斯越桔根芽嫩莖段的萌發(fā)照片；

圖2是篤斯越桔根瘤誘導(dǎo)初期培養(yǎng)照片；

圖3是篤斯越桔根瘤誘導(dǎo)中期照片；

圖4是篤斯越桔根瘤誘導(dǎo)后期照片；

圖5是篤斯越桔含有根瘤的植株照片；

圖6是篤斯越桔不含根瘤的植株照片。

具體實施方式