[發明專利]一種土黨參組培快繁方法

有效

• 申請號: 201010166822.9
• 申請日: 2010-05-06
• 公開（公告）號: CN101869074A
• 公開（公告）日: 2010-10-27
• 發明（設計）人: 徐剛;陳劍平;汪一婷;呂永平;牟豪杰
• 申請（專利權）人: 浙江省農業科學院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01G31/00
• 代理公司: 杭州九洲專利事務所有限公司 33101
• 代理人: 陳繼亮

技術領域

本發明涉及植物組培快繁技術領域，尤其涉及一種土黨參組培快繁方法。

背景技術

土黨參為桔梗科金錢豹屬植物金錢豹(土黨參)(Campanumoea?javanica?B1.Subsp.Japonica(Makino)Hong)或大花金錢豹(Campanumoea?javanica?Blume)的根。金錢豹(土黨參)和大花金錢豹為多年生纏繞藤本植物。生于低山區的向陽坡地上。主要分布于東亞、我國南部和西南部。主根肥大、肉質、米黃色，須根少。具有健脾胃、補肺氣、祛痰止咳等功能，治虛勞內傷、肺虛咳嗽、脾虛泄瀉、乳汁不多、小兒疳積、遺尿等癥。藥用植物土黨參少有栽培，中藥材土黨參靠野生采集，生長也較為緩慢，致使該天然資源日趨貧乏，自然條件下，利用種子或根莖進行繁殖，但其種子發芽率低，繁殖率低，種苗質量參差不齊，難以滿足生產上對優質種苗的要求。

發明內容

本發明要解決上述現有技術的缺陷，提供一種土黨參組培快繁方法。

本發明目的通過以下技術方案來實現：這種土黨參組培快繁方法，按如下步驟進行：

1)、外植體的選取與預處理：從土黨參植株上剪取長5～10cm的新萌發的嫩枝，剪去葉片，用加有1％(體積比)洗潔精的自來水中漂洗10～30分鐘后，用自來水沖洗20～40分鐘；

2)、外植體滅菌：將預處理后的嫩枝切成長1～2.cm的帶頂芽的莖段或帶腋芽的莖段作為外植體，經表面滅菌處理后備用；

3)、誘導培養：在無菌條件下將經表面滅菌后的帶頂芽的莖段或帶腋芽的莖段外植體的一端或二端切口變褐處切除后，頂芽和帶腋芽莖段的芽向上接種在誘導培養基中，在培養條件下培養30～45天后，誘導頂芽和腋芽萌芽，然后誘導出叢生芽并抽長成藤條；

4)、增殖培養：在無菌條件下將藤條切成一節一節接入增殖培養基中進行增殖培養，在培養條件下培養30～45天誘導出叢生芽并抽長成藤條；根據對幼苗數量的需求，每隔30～45天按同樣方法進行組培苗再增殖培養；

5)、生根培養：將藤條切成一節一節后，接種在生根培養基中進行生根培養，在培養條件下培養20～30天后，藤條抽長成5～7cm、苗基部長出3～5根細根；

6)、移栽：將生根組培苗移栽于穴盤內的育苗袋中，培育1～2個月至成苗。

其中，基本培養基和各階段培養基中添加物的含量為：

(1)基本培養基：選用MS基本培養基，蔗糖或白糖20～30g/L，瓊脂7～9g/L，pH5.6～5.8；

(2)誘導培養基：MS+細胞分裂素0.1～5.0mg/L+生長素0.0～0.5mg/L+蔗糖或白糖30g/L；

(3)增殖培養基：MS+細胞分裂素0.1～3.0mg/L+生長素0.0～0.5mg/L+蔗糖或白糖30g/L；

(4)生根培養基：1/2MS+生長素0.1～1.0mg/L+蔗糖或白糖20g/L；

所述的細胞分裂素為BA或KT，生長素為NAA或IAA或IBA。

所述的表面滅菌處理是預處理后的外植體用75％(體積比)酒精表面消毒30～45秒，無菌水沖洗3遍，然后用0.1％(重量比)升汞溶液浸泡振蕩滅菌10～15分鐘，無菌水洗3～5遍；或預處理后的外植體用75％(體積比)酒精表面消毒30～45秒，無菌水沖洗3遍，然后用2％(體積比)次氯酸鈉溶液振蕩滅菌10～15分鐘，無菌水洗3～5遍。

所述的各組培階段的培養條件是，培養溫度為23～28℃，光照光強為2500～3000Lx，光照時間為10～16h/d。

所述的培養基，包括基本培養基和各階段培養基中添加物的含量為：

(1)基本培養基：選用MS培養基，蔗糖或白糖20～30g/L，瓊脂7～9g/L，pH5.6～5.8；

(2)誘導培養基：MS+細胞分裂素0.5mg/L+生長素0.05mg/L+蔗糖或白糖30g/L；

(3)增殖培養基：MS+細胞分裂素0.1mg/L+生長素0.01mg/L+蔗糖或白糖30g/L；

(4)生根培養基：1/2MS+生長素0.25mg/L+蔗糖或白糖20g/L；

所述的細胞分裂素為BA或KT，生長素為NAA或IAA或IBA。

所述的育苗袋為泥炭、珍珠巖、蛭石以體積比為5∶1∶1的比例配制而成。

所述的土黨參為金錢豹(土黨參)和大花金錢豹。