[發明專利]一種土黨參組培快繁方法

有效

• 申請號: 201010166822.9
• 申請日: 2010-05-06
• 公開（公告）號: CN101869074A
• 公開（公告）日: 2010-10-27
• 發明（設計）人: 徐剛;陳劍平;汪一婷;呂永平;牟豪杰
• 申請（專利權）人: 浙江省農業科學院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01G31/00
• 代理公司: 杭州九洲專利事務所有限公司 33101
• 代理人: 陳繼亮

1.一種土黨參組培快繁方法，其特征在于：該方法按以下步驟進行：

1)、外植體的選取與預處理：從土黨參植株上剪取長5～10cm的新萌發的嫩枝，剪去葉片，用加有1％體積比洗潔精的自來水中漂洗10～30分鐘后，用自來水沖洗20～40分鐘；

2)、外植體滅菌：將預處理后的嫩枝切成長1～2cm的帶頂芽的莖段或帶腋芽的莖段作為外植體，經表面滅菌處理后備用；

3)、誘導培養：在無菌條件下將經表面滅菌后的帶頂芽的莖段或帶腋芽的莖段外植體的一端或二端切口變褐處切除后，頂芽和帶腋芽莖段的芽向上接種在誘導培養基中，在培養條件下培養30～45天后，誘導頂芽和腋芽萌芽，然后誘導出叢生芽并抽長成藤條；

4)、增殖培養：在無菌條件下將藤條切成一節一節接入增殖培養基中進行增殖培養，在培養條件下培養30～45天誘導出叢生芽并抽長成藤條；根據對幼苗數量的需求，每隔30～45天按同樣方法進行組培苗再增殖培養；

5)、生根培養：將藤條切成一節一節后，接種在生根培養基中進行生根培養，在培養條件下培養20～30天后，藤條抽長成5～7cm、苗基部長出3～5根細根；

6)、移栽：將生根組培苗移栽于穴盤內的育苗袋中，培育1～2個月至成苗；

其中，基本培養基和各階段培養基中添加物的含量為：

(1)基本培養基：選用MS基本培養基，蔗糖或白糖20～30g/L，瓊脂7～9g/L，pH5.6～5.8；

(2)誘導培養基：MS+細胞分裂素0.1～5.0mg/L+生長素0.0～0.5mg/L+蔗糖或白糖30g/L；

(3)增殖培養基：MS+細胞分裂素0.1～3.0mg/L+生長素0.0～0.5mg/L+蔗糖或白糖30g/L；

(4)生根培養基：1/2MS+生長素0.1～1.0mg/L+蔗糖或白糖20g/L；

所述的細胞分裂素為BA或KT，生長素為NAA或IAA或IBA。

2.根據權利要求1所述的土黨參組培快繁方法，其特征在于：所述的表面滅菌處理是預處理后的外植體用75％體積比酒精表面消毒30～45秒，無菌水沖洗3遍，然后用0.1％重量比升汞溶液浸泡振蕩滅菌10～15分鐘，無菌水洗3～5遍；或預處理后的外植體用75％體積比酒精表面消毒30～45秒，無菌水沖洗3遍，然后用2％體積比次氯酸鈉溶液振蕩滅菌10～15分鐘，無菌水洗3～5遍。

3.根據權利要求1所述的土黨參組培快繁方法，其特征在于，所述的各組培階段的培養條件是，培養溫度為23～28℃，光照光強為2500～3000Lx，光照時間為10～16h/d。

4.根據權利要求1所述的土黨參組培快繁方法，其特征在于：所述的培養基，包括基本培養基和各階段培養基中添加物的含量為：

(1)基本培養基：選用MS培養基，蔗糖或白糖20～30g/L，瓊脂7～9g/L，pH5.6～5.8；

(2)誘導培養基：MS+細胞分裂素0.5mg/L+生長素0.05mg/L+蔗糖或白糖30g/L；

(3)增殖培養基：MS+細胞分裂素0.1mg/L+生長素0.01mg/L+蔗糖或白糖30g/L；

(4)生根培養基：1/2MS+生長素0.25mg/L+蔗糖或白糖20g/L；

所述的細胞分裂素為BA或KT，生長素為NAA或IAA或IBA。

5.根據權利要求1所述的土黨參組培快繁方法，其特征在于：所述的育苗袋為泥炭、珍珠巖、蛭石以體積比為5∶1∶1的比例配制而成。

6.根據權利要求1所述的土黨參組培快繁方法，其特征在于：所述的土黨參為金錢豹和大花金錢豹。