[發(fā)明專利]微生物發(fā)酵生產(chǎn)低溫脂肪酶的方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201010162740.7 | 申請日： | 2010-04-09 |
| 公開（公告）號： | CN102093988A | 公開（公告）日： | 2011-06-15 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 張慶芳;遲乃玉;竇少華;于爽 | 申請（專利權(quán)）人： | 大連大學(xué) |
| 主分類號： | C12N9/20 | 分類號： | C12N9/20 |
| 代理公司： | 大連智慧專利事務(wù)所 21215 | 代理人： | 周志艦 |
| 地址： | 116622 遼寧省*** | 國省代碼： | 遼寧;21 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 微生物 發(fā)酵 生產(chǎn) 低溫 脂肪酶 方法 | ||
1.一種微生物發(fā)酵生產(chǎn)低溫脂肪酶的方法，其包括以下步驟：
(1)將產(chǎn)生脂肪酶的微生物逐級低溫馴化，馴化溫度由高到低，25℃→22℃→20℃→18℃→16℃→14℃，使其在低溫環(huán)境中生長良好；
(2)按常規(guī)方法將低溫馴化后的纖維素酶產(chǎn)生菌在14～20℃逐級擴大培養(yǎng)，制備成液體一級種子和二級種子；
(3)將液體一級種子或二級種子，按發(fā)酵液體積的3～9％接種量接入產(chǎn)酶培養(yǎng)基中，在14～20℃培養(yǎng)48～120h，即微生物發(fā)酵生產(chǎn)低溫脂肪酶結(jié)束；
(4)將(3)的發(fā)酵液在4,000～8,000rpm離心收集液體，收集到的液體即為粗酶液；
(5)根據(jù)不同需要和使用對象不同，將(4)得到的粗酶液進一步濃縮、分離純化，制備成不同活性、純度和劑型的酶制劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中菌種低溫馴化培養(yǎng)基、液體種子培養(yǎng)基、產(chǎn)酶培養(yǎng)基分別為：
(1)菌種低溫馴化培養(yǎng)基：蛋白胨5.0g～50.0g，橄欖油5.0g～8.0g，瓊脂20.0g，蒸餾水1.0L，pH自然，121℃蒸氣滅菌30min。
(2)液體種子培養(yǎng)基：蛋白胨5.0g～50.0g，酵母提取物5.0g～8.0g，橄欖油4.0～8.0g；MgSO4·7H2O?0.5～1.0g，KH2PO4?1.0～5.0g；自來水1.0L，pH自然，121℃蒸氣火菌30min。
(3)產(chǎn)酶培養(yǎng)基：2.0g～50.0g；牛肉浸膏10.0g～50.0g，KH2PO4?1.0～5.0g；MgSO4·7H2O?0.5～1.0g，橄欖油4.0g～8.0g，自來水1.0L，pH自然，121℃蒸氣滅菌30min。
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