[發明專利]一種化合物及其應用于單胺氧化酶活性的熒光檢測方法

有效

• 申請號: 201010158059.5
• 申請日: 2010-04-28
• 公開（公告）號: CN101812055A
• 公開（公告）日: 2010-08-25
• 發明（設計）人: 朱勍;賈朝;宋明貴
• 申請（專利權）人: 浙江工業大學
• 主分類號: C07D405/12
• 分類號: C07D405/12;C07D413/12;C07D417/14;C07D211/74;C09K11/06;G01N21/64
• 代理公司: 杭州天正專利事務所有限公司 33201
• 代理人: 黃美娟;王兵

1.一種如式(I)所示的化合物：

式(I)中，R₂為如式(II)所示的熒光基團：

式(I)中，R₁為C1～C10的烷基、C2～C10的烯基、苯基或芐基。

2.如權利要求1所述的化合物，其特征在于所述的R₁為CH₃、C₂H₅、 C₃H₅或芐基。

3.如權利要求1所述的如式(I)所示的化合物的制備方法，其特征 在于所述的方法包括以下步驟：(a)如式C所示的4-鹵代吡啶和鹵 代烴R₁X反應，得到式A所示的1-取代-4-鹵代吡啶鹽，所述X為F、 Cl、Br或I，Y為Cl、Br或I；(b)有機溶劑中，步驟(a)得到的 式A所示的1-取代-4-鹵代吡啶鹽與熒光化合物H-R₂在堿性物質的作 用下，反應得到式B所示的吡啶類化合物，所述的堿性物質為無機 堿性物質或有機堿性物質；(c)步驟(b)得到的式B所示的吡啶類化 合物與硼氫化鈉進行還原反應得到式(I)所示的化合物；

R₂為如式(II)所示的熒光基團：

R₁為C1～C10的烷基、C2～C10的烯基、苯基或芐基。

4.如權利要求3所述的方法，其特征在于所述的無機堿性物質為碳 酸鉀、碳酸鈉、甲醇鈉、氫氧化鋰、氫氧化鉀、氫氧化鈉或氫化鈉； 所述的有機堿性物質為三乙胺、N，N-二異丙基乙胺、吡啶或哌啶；所 述的有機溶劑為DMF、DMSO、CH₃CN或C1～C5的脂肪醇。

5.如權利要求3所述的方法，其特征在于所述的方法包括以下步驟： (a)如式C所示的4-鹵代吡啶在-10～50℃下，與鹵代烴R₁X反應 10～15小時，反應結束后即得到式A所示的1-取代-4-鹵代吡啶鹽， 所述X為F、Cl、Br或I；(b)步驟(a)得到的式A所示的1-取代 -4-鹵代吡啶鹽與熒光化合物H-R₂在堿性物質的作用下，以DMF為 溶劑，室溫下反應12～16小時，反應結束后反應液過濾，取濾餅得到 式B所示的吡啶類化合物，所述的堿性物質為Na₂CO₃、K₂CO₃、NaOH、 LiOH、KOH、三乙胺、N，N-二異丙基乙胺、吡啶或哌啶；(c)步驟(b) 得到的式B所示的吡啶類化合物在-10～30℃溫度下，與硼氫化鈉進行 還原反應，反應結束后反應液分離處理得到式(I)所示的化合物純 品；所述4-鹵代吡啶、熒光化合物H-R₂、鹵代烴R₁X、堿性物質、 硼氫化鈉的物質的量之比為1∶1∶6～10∶1～10∶1～20。

6.如權利要求5所述的方法，其特征在于所述的步驟(c)中，反應 液分離處理方法為：反應結束后，反應液中加入飽和NaCl水溶液， 用乙酸乙酯萃取，取有機層經過干燥、過濾、蒸干，即得所述式(I) 所示的化合物粗品，式(I)所示的化合物粗品進行柱層析，以乙酸 乙酯和石油醚的體積比為5∶1的溶液為流動相，TLC跟蹤收集Rf 值為0.3-0.5的洗脫液，收集得到的洗脫液經減壓除去溶劑，得到式 (I)所示的化合物純品。

7.如權利要求1所述的如式(I)所示的化合物的應用，所述應用為 如式(I)所示的化合物作為熒光探針，應用于單胺氧化酶活性的熒 光檢測。

8.如權利要求7所述的應用，其特征在于所述的單胺氧化酶活性的 熒光檢測的方法為：以如式(I)所示的化合物作為熒光探針，單胺 氧化酶水解熒光探針形成熒光物質，測定熒光強度，從而獲得單胺氧 化酶活性強度。