[發明專利]可用于高通量全自動化提取的磁珠法病毒核酸提取方法

有效

• 申請號: 201010157542.1
• 申請日: 2010-04-28
• 公開（公告）號: CN101851617A
• 公開（公告）日: 2010-10-06
• 發明（設計）人: 王剛;王延旭;戴潔;董濤;王凌云;吳曉明
• 申請（專利權）人: 長春市博坤生物科技有限公司
• 主分類號: C12N15/10
• 分類號: C12N15/10
• 代理公司: 吉林長春新紀元專利代理有限責任公司 22100
• 代理人: 余巖

1.一種可用于高通量全自動化提取的磁珠法病毒核酸提取方法，其特征在于包括下列步驟：

(1)、先用磁珠I分離病毒：從生物樣品中將病毒吸附到磁珠I上，得到吸附有病毒的磁珠I，簡稱病毒-磁珠I復合物，外加磁場將病毒-磁珠I復合物與樣品分開，將病毒-磁珠I復合物懸浮于裂解液I中，在裂解液I中病毒從磁珠I上解離，外加磁場除去磁珠I，加熱使病毒裂解；

(2)、再用磁珠II分離病毒核酸：用磁珠II吸附病毒裂解物中的病毒核酸，外加磁場將吸附有病毒核酸的磁珠II與病毒裂解物分開，用洗滌液洗滌吸附有病毒核酸的磁珠II后，用溶解液將病毒核酸從磁珠II上洗脫下來得到純化的病毒核酸。

2.根據權利要求1所述的可用于高通量全自動化提取的磁珠法病毒核酸提取方法，其特征在于：所述磁珠I具有可吸附病毒的特征，它包含兩個部分，一部分是可吸附病毒的凝膠；另一部分為具有超順磁性的磁性納米粒子Fe、Co、Ni、Fe₂O₃、Fe₃O₄、Co₂O₃、Co₃O₄中一種或兩種以上的混合物。

3.根據權利要求1所述的可用于高通量全自動化提取的磁珠法病毒核酸提取方法，其特征在于：所述裂解液I能夠使吸附于磁珠I表面的病毒解離，并促進病毒在加熱條件下裂解，還能促進病毒核酸吸附于磁珠II，其包含使吸附于磁珠I表面的病毒解離的物質，還包含但不限于0-2mol/L離液鹽和/或0-50mmol/LEDTA和調節pH在3.5-7.0的緩沖液。

4.根據權利要求1所述的可用于高通量全自動化提取的磁珠法病毒核酸提取方法，其特征在于：對于有細胞液體樣品如細胞、全血、動物組織勻漿液、植物組織勻漿液，需要在步驟(1)之前用裂解液II裂解生物樣品中的細胞。

5.根據權利要求4所述的可用于高通量全自動化提取的磁珠法病毒核酸提取方法，其特征在于：裂解液II可以徹底裂解細胞而保持病毒完整性，其成分為離液鹽、尿素、去垢劑、EDTA、還原劑、蛋白酶中的一種或兩種以上的混合物，還包含調節pH范圍在3.5-7.0的緩沖液，還包含磁珠I表面凝膠吸附病毒所必需的物質。