[發(fā)明專利]白鮮皮中單體化合物的提純方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201010156107.7
• 申請日: 2010-04-27
• 公開（公告）號: CN101805344A
• 公開（公告）日: 2010-08-18
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉東鋒;郭琴;楊成東
• 申請（專利權(quán)）人: 南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司
• 主分類號: C07D491/048
• 分類號: C07D491/048
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及白鮮皮中單體化合物的提純方法，尤其是分離純化白鮮堿的方法。

背景技術(shù)：

白鮮屬蕓香科植物白鮮Dictammus?dasycarpus?Turcz.的干燥根皮。具有清熱燥濕，祛風(fēng)解毒功效。用于濕熱瘡毒，黃水淋漓，濕疹，風(fēng)疹，疥癬瘡癩，風(fēng)濕熱痹，黃疸尿赤。白鮮堿(dicatamine)屬于喹啉類生物堿，分子式C₁₂H₉NO₂，分子量199.20；為棱柱結(jié)晶，熔點(diǎn)133℃，溶于熱乙醇及氯仿，略微溶于乙醚，實際不溶于水。中藥白鮮皮主要化學(xué)成分為生物堿，自鮮堿為其重要活性成分，含量0.022-0.1％。

藥理研究表明白鮮堿可通過間接影響真菌細(xì)胞遺傳物質(zhì)的正常合成從而抑制真菌生長甚至導(dǎo)致死亡，其在紫外線長波UVA照射下，可鈍化小鼠MCMV和togavirus，具有體外抗癌活性，另外白鮮堿還具有動脈血管舒張效應(yīng)，為鈣離子拮抗劑，能與DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)中的嘧啶堿基形成加成物，有可能成為牛皮癬治療藥物，發(fā)展前景可觀。白鮮堿具有多樣生物活性，需要進(jìn)行更加深入的研究，這就需要較多的高含量白鮮堿，然而目前國內(nèi)尚無白鮮堿提取工藝方面的相關(guān)專利，李翔等公開的文獻(xiàn)“從白鮮皮中同時制備梣酮、白鮮堿、黃柏酮單體的方法”采用乙酸乙酯回流提取，硅膠常壓柱層析，石油醚-丙酮梯度洗脫，丙酮重結(jié)晶，該方法提取率低，且晶形不理想。國外文獻(xiàn)主要通過人工合成白鮮堿，反應(yīng)條件不易控制，且產(chǎn)品不穩(wěn)定，產(chǎn)率低。

發(fā)明內(nèi)容：

本發(fā)明的目的是客服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，提供一種適合工業(yè)生產(chǎn)，并且提取純化白鮮皮中重要活性成分白鮮堿的工藝。

本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的：

(1)提取：將粉碎后的白鮮皮用4-6倍(V/W)水回流提取雜質(zhì)，殘渣干燥后用8-15倍(V/W)的80％-95％體積濃度的乙醇-酸水溶液液泛法提取3-6小時，提取液冷卻、減壓濃縮成稀浸膏；

(2)樹脂吸附分離：將上述稀浸膏調(diào)pH10-11，乙酸乙酯反復(fù)萃取，至萃余液生物堿反應(yīng)為陰性。將乙酸乙酯萃取液上D101、AB-8、XAD-4或XAD-7大孔吸附樹脂飽和吸附，石油醚洗脫雜質(zhì)，氯仿-乙醇(50∶1-4∶1)洗脫，HPLC跟蹤檢識，洗脫至無白鮮堿流分，收集白鮮堿流分；

(3)氧化鎂柱層析：將白鮮堿流分干法上氧化鎂柱層析，戊醇-乙酸乙酯(6∶1-2∶1)洗脫，收集白鮮堿流分；

(4)重結(jié)晶：將白鮮堿流分減壓濃縮，真空干燥得粗品。將粗品用熱無水乙醇飽和溶解，冷卻，緩慢加入去離子水，靜置結(jié)晶，過濾冷凍干燥即得產(chǎn)品。

所述乙醇-酸水溶液為乙醇與鹽酸水溶液的混合溶液，鹽酸濃度為總提取溶劑體積的0.1-0.5％。

所述調(diào)pH所用堿可選氨水溶液、氫氧化鈉溶液或碳酸氫鈉溶液。

所述大孔樹脂洗脫條件：洗脫流速控制在0.5-1BV/h，每500ml洗脫液接收一部分，洗脫至HPLC檢識無白鮮堿；樹脂用量為藥材等倍量。

所述氧化鎂為與原料的比例為10∶1-5∶1，優(yōu)選比例7∶1。

綜合以上所述，本發(fā)明具有以下特點(diǎn)：

1)水回流提取雜質(zhì)，可除去部分水溶性雜質(zhì)，初步提高了產(chǎn)品質(zhì)量。

2)以液泛法代替?zhèn)鹘y(tǒng)的回流提取法、索式提取法、滲漉法、浸提法，快速、高效。

3)酸醇提取提取，且較乙酸乙酯提取成本低。

具體實施方式：

下面結(jié)合實施例對本發(fā)明做進(jìn)一步的說明。

實施例1：

將白鮮皮粉碎，取10kg投入自制液泛提取罐，加入50L水提取，棄去提取液，殘渣真空干燥后加入100L含0.1％鹽酸的85％乙醇溶液提取4小時，將提取液趁熱過濾，冷卻，減壓濃縮至密度為1.2，加10％氨水調(diào)pH至10，加乙酸乙酯反復(fù)萃取至萃余液生物堿反應(yīng)為陰性。將乙酸乙酯萃取液上預(yù)處理好的XAD-4大孔吸附樹脂飽和吸附，先用4BV石油醚洗脫雜質(zhì)，再用氯仿-乙醇(48∶2)洗脫，HPLC跟蹤檢識，收集白鮮堿流分，減壓濃縮得到粗提物；將相當(dāng)于粗提物5倍量的氧化鎂裝柱，預(yù)處理，將流分進(jìn)行氧化鎂柱層析，用戊醇-乙酸乙酯(65∶25)洗脫，將流分分別減壓濃縮、真空干燥得粗晶。將粗晶用無水乙醇加熱飽和溶解，冷卻，緩慢加入1倍飽和液的去離子水，靜置結(jié)晶，過濾，冷凍干燥后稱重得白鮮堿3.8g(含量為95.4％)。

實施例2：