[發明專利]淋巴結靶向轉移性人肝癌細胞株及其建立方法

有效

• 申請號: 201010153268.0
• 申請日: 2010-04-22
• 公開（公告）號: CN101831404A
• 公開（公告）日: 2010-09-15
• 發明（設計）人: 吳偉忠;陶中華;李薇薇;孫惠川;湯釗猷;樊嘉;欽倫秀;王魯
• 申請（專利權）人: 復旦大學附屬中山醫院
• 主分類號: C12N5/09
• 分類號: C12N5/09;C12R1/91
• 代理公司: 上海申匯專利代理有限公司 31001
• 代理人: 翁若瑩

1.一種淋巴結靶向轉移性人肝癌細胞株，母細胞為紅色熒光蛋白表達肝癌細胞HCCLM3-R，其特征在于，所述細胞分類命名為：淋巴結靶向轉移人肝癌細胞株HCCLM3-R-LnM1，保藏編號：3645，具有以下生物學特性：細胞呈多邊形上皮樣，貼壁生長，接觸性生長抑制喪失，亞三倍體核型，染色體數目50-58條，均分泌AFP蛋白，可穩定表達高強度紅色熒光，遺傳性狀穩定、可在常規條件下連續傳代，具有淋巴結靶向轉移克隆選擇優勢，在裸鼠肝臟原位移植后第2周首先出現淋巴結轉移，轉移率為71.4％，至第4周轉移率達100％，而肺轉移在第3周開始出現，為14.3％，第4周為28.6％，晚期可全身轉移。

2.如權利要求1所述的淋巴結靶向轉移性人肝癌細胞株，其特征在于，所述淋巴結靶向轉移性人肝癌細胞HCCLM3-R-LnM1的熒光顯微鏡觀察條件是：激發波長560nm，發射波長585nm。

3.權利要求1所述的淋巴結靶向轉移性人肝癌細胞株的建立方法，其特征在于，具體步驟為：以紅色熒光蛋白表達肝癌細胞HCCLM3-R為母細胞，建立裸鼠皮下移植瘤模型，得到皮下腫瘤小塊；建立裸鼠肝臟移植瘤模型，將皮下腫瘤小塊植入裸鼠的肝臟表面；42天后，處死裸鼠，打開腹腔，取出淋巴結轉移灶組織，將淋巴結轉移灶組織碾磨、離心得到細胞沉淀，經培養和逐級克隆，分選獲得淋巴結靶向轉移性人肝癌細胞株。