[發明專利]一種人血白蛋白的生產方法

有效

• 申請號: 201010152489.6
• 申請日: 2010-04-20
• 公開（公告）號: CN101851604A
• 公開（公告）日: 2010-10-06
• 發明（設計）人: 熊軍;孫利群;婁彩玲
• 申請（專利權）人: 上海新都生物科技有限公司
• 主分類號: C12N5/071
• 分類號: C12N5/071;C07K14/765;C07K1/14
• 代理公司: 上海碩力知識產權代理事務所 31251
• 代理人: 王法男

技術領域

本發明涉及一種生物制造技術，尤其是一種人血白蛋白的生產方法。

背景技術

白蛋白(albumin)是由肝實質細胞合成，是血漿中含量最多的蛋白質，占血漿總蛋白的40％-60％。白蛋白可為不同動物體組織用于組織修補。

白蛋白的結構已于1975年被研究人員闡明，為含585個氨基酸的單鏈多肽，分子量為66458，不含有糖的組分，它是動物血漿中很主要的載體，許多物質可以通過與白蛋白的結合而被運輸。這些物質包括膽汁酸鹽，前列腺素，激素、Cu2+、Ni2+、Ca2+，以及注入血管的藥物。

現代醫學研究表明，白蛋白的主要生理作用如下：

(1)維持血漿滲透壓的恒定

白蛋白是血漿中含量最多、分子最小、溶解度大、功能較多的一種蛋白質。血漿膠體滲透壓的維持主要依靠血漿中的白蛋白，膠體滲透壓是使靜脈端組織間液重新返回血管內的主要動力。當血漿白蛋白因病理條件引起下降時，血漿的膠體滲透壓也隨之下降。

(2)生理上具有運輸功能

血漿白蛋白能與體內許多難溶性的小分子離子可逆地結合，形成易溶性的復合物，成為這些物質在血液循環中的有效運輸載體。由此可見白蛋白屬于非專一性的運輸蛋白，在生理上具有重要性。

(3)白蛋白的其它生理作用

血漿中白蛋白的含量遠比球蛋白多，親水作用又比球蛋白大，這使血漿中的白蛋白對球蛋白起到一種膠體保護的穩定作用。一旦生理功能障礙引起白蛋白合成不足時，可使血漿球蛋白失去膠體保護作用，穩定性下降。血漿球蛋白的穩定性下降，將嚴重影響這些物質在體內的代謝、利用，引起相應的癥狀。同時，白蛋白還是人體內一種重要的營養物質。白蛋白在血漿中也不斷地進行著代謝更新，血漿白蛋白分解產生的氨基酸，可用于合成組織蛋白，氧化分解以供應能量或轉變成其它含氮物質。

白蛋白是血液制品的一種，稱“生命制品”，通常它是從健康人的血液中提煉加工而成，直接靜脈注射到病人體內，其主要功能是增強人的免疫力和抵抗力。臨床上主要用于失血創傷和燒傷等引起的休克、腦水腫，以及肝硬化、腎病引起的水腫等危重病癥患者、以及低蛋白血癥病人的治療。

白蛋白在國際市場上占血液制劑銷售額的首位，1998年增至650噸，到2006年全世界的總消耗量接近850噸。歐、美等國家，人均消耗超過0.5克/年，瑞士、德國、日本人均消耗超過0.8克/年.中國市場2002年白蛋白銷售量為80噸，中國白蛋白消耗主要集中于城市，如按12億人口計算，則人均消耗為0.40克，僅為發達國家的1/2，現階段的白蛋白總量應為120噸。國際市場上白蛋白的售價為每克5美元。

目前臨床使用的人血白蛋白來源于以下兩種途徑：

其一，是從人體血液中提取的血漿蛋白制劑；

其二，是通過采用酵母發酵或動物細胞培養法，生產基因重組的人血清白蛋白。

上述第一種方法獲得的血漿蛋白制劑，不僅使血源產品的生產受到血源供應的限制，同時還存在因原料血漿提供者攜帶的含有肝炎、艾滋病等傳染病引起的隱患性危險。第二種采用酵母發酵或動物細胞培養生產重組人血清白蛋白方法，雖然在降低血源產品傳染病的安全風險方面具有優勢，但是又會帶來動物和細菌的異源質(免疫源)問題，使基因重組白蛋白因存在生理功能不確定的缺陷而引起的不可知隱患。

正是由于血液制品制作原料來源的特殊性，近兩年白蛋白仍被列為國內最短缺的藥品。目前，國內外多數企業采用基因重組技術生產人血白蛋白，即：使用人血白蛋白的基因克隆，將該基因插入到某種生物進行復制，然后收集蛋白。一些常見的蛋白表達系統有：細菌、酵母、哺乳動物等，日本三菱制藥公司2002年組建了酵母生產設施，2005年在日本進行了III期臨床，2006年8月，該公司投資3億美元建造rHA規模生產線，其在大規模生產建設方面的投入超過了歐美國家。由于生產能力的限制，2008年，其銷售量重點在日本，生產重組白蛋白的能力接近4噸/年。

然而，由于基因重組白蛋白存在以下缺陷：

1.異源質，2.純度99.9999％以上，3.皮試，4.生理功能不確定，5.安全性.6.異構體。

所以，直至今日還沒有企業能夠真正實現將生產產品使用于醫學臨床實踐。

因此，探索全新的白蛋白生產技術，解決工業上能夠生產的人血白蛋白基本原料的選擇、克服現有各種白蛋白產品使用中存在的隱患，已經成為本行業廣大科技人員的重要課題。

發明內容

本發明的目的：旨在提出一種具有可靠實用價值、價格適中，并能工業化批量生產的人血白蛋白制造技術。