[發(fā)明專利]魚肉制品中金槍魚種源的檢測方法無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201010150275.5 | 申請日： | 2010-03-17 |
| 公開（公告）號： | CN102191315A | 公開（公告）日： | 2011-09-21 |
| 發(fā)明（設計）人： | 高宏偉;林超;孫敏;劉彩霞;徐彪 | 申請（專利權）人： | 山東出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術中心 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68;G01N21/64;C12N15/11 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 266002 *** | 國省代碼： | 山東;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 魚肉 制品 金槍 魚種 檢測 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種金槍魚物種鑒定的快速檢測方法，其特征在于其中的引物：
上游引物Jinqiang230F?5’-CTCCCTCTTTCCTTCTGC-3’；
下游引物Jinqiang568R：5’-AGGTTGTATTTAGGTTTCG-3’。
2.一種使用權利要求一所述的快速鑒定金槍魚物種的檢測方法，其特征是依次包括下列步驟：
(1)待檢樣品的DNA提取；
(2)金槍魚CO?I基因的實時熒光PCR擴增：
在裝有24μL的PCR擴增反應液的反應管中加入1μL的待檢樣品DNA，混勻。按照下述步驟完成PCR擴增。
94-95℃?2-4min，1個循環(huán)；
94-95℃?10-60s，61℃?10-60s，共40個循環(huán)；
95℃?15s，60℃?15s，20min內(nèi)升溫至95℃，95℃?15s。
(3)使用熔解曲線分析PCR產(chǎn)物。
金槍魚擴增產(chǎn)物溶解曲線的峰值在83±0.5℃和89±0.5℃出現(xiàn)雙峰。
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