[發明專利]一種生物素蛋白連接酶融合蛋白

無效

• 申請號: 201010146660.2
• 申請日: 2010-03-15
• 公開（公告）號: CN102190730A
• 公開（公告）日: 2011-09-21
• 發明（設計）人: 雷建強;叢薇;袁靖宇
• 申請（專利權）人: 上海澤潤生物科技有限公司
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/62;C12N15/63;C12N1/21;C12R1/19
• 代理公司: 上海天翔知識產權代理有限公司 31224
• 代理人: 王裕

1.一種如下(a)或(b)的生物素蛋白連接酶融合蛋白：

(a)其氨基酸序列包括SEQ?ID?NO.1所述的氨基酸序列，其N端為多聚堿性氨基酸的蛋白；

(b)至少與SEQ?ID?NO.1所述氨基酸序列90％同源性、N端為多聚堿性氨基酸且具有生物素蛋白連接酶活性的蛋白。

2.如權利要求1所述的生物素蛋白連接酶融合蛋白，其特征在于所述多聚堿性氨基酸為多聚組氨酸。

3.如權利要求2所述的生物素蛋白連接酶融合蛋白，其特征在于所述多聚組氨酸為6聚組氨酸。

4.如權利要求1所述的生物素蛋白連接酶融合蛋白，其特征在于所述生物素蛋白連接酶融合蛋白為SEQ?ID?NO.2所述氨基酸序列。

5.一種編碼權利要求1所述生物素蛋白連接酶融合蛋白多核苷酸分子。

6.一種包含權利要求5所述多核苷酸分子的重組表達載體。

7.一種包含權利要求6所述重組表達載體的轉化體。

8.如權利要求7所述的轉化體，其特征在于所述轉化體為大腸桿菌。

9.如權利要求8所述的轉化體，其特征在于所述大腸桿菌為大腸桿菌BL21。

10.權利要求1所述生物素蛋白連接酶融合蛋白的制備方法，包括如下步驟：

①生物素蛋白連接酶融合蛋白表達載體的構建；

②生物素蛋白連接酶融合蛋白轉化體的制備；

③生物素蛋白連接酶融合蛋白的表達；

④生物素蛋白連接酶融合蛋白的純化。

11.如權利要求10所述的制備方法，其特征在于所述步驟④采取金屬螯合柱純化。

12.如權利要求11所述的制備方法，其特征在于所述金屬螯合柱為鎳離子金屬螯合柱。