[發(fā)明專利]糖類的分析方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201010144089.0
• 申請日: 2010-03-11
• 公開（公告）號: CN101839898A
• 公開（公告）日: 2010-09-22
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 橫山哲雄
• 申請（專利權(quán)）人: 日本化學(xué)研究株式會社
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N21/64
• 代理公司: 上海專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 31100
• 代理人: 馮雅;胡燁

1.一種分離分析方法，它是試樣中所含的還原糖的采用柱色譜法的分離分析方法，其特征在于，包括下述步驟：

將試樣裝載于陰離子交換樹脂柱中，藉由使足量的由含規(guī)定濃度的水溶性無機鹽的規(guī)定濃度的硼酸水溶液形成的第一流動相通過所述柱來對柱進行清洗；

以規(guī)定的流速連續(xù)地向所述柱供給將所述鹽的濃度提高至高于所述第一流動相的第二流動相，藉由所述第二流動相將還原糖洗脫；

將來自所述柱的洗脫液連續(xù)地導(dǎo)入流路中；

通過在所述流路的規(guī)定位置以規(guī)定速度連續(xù)地向所述洗脫液中添加至少1種堿性氨基酸，從而形成在所述流路中連續(xù)地流動的混合溶液；

通過使所述混合溶液用規(guī)定時間通過所述流路的規(guī)定溫度的加熱區(qū)域，從而對所述混合溶液進行加熱；

在所述流路的規(guī)定位置對加熱后的在所述流路中流動的所述混合溶液連續(xù)地照射激發(fā)光的同時，連續(xù)地測定并記錄從所述混合溶液發(fā)射的熒光的強度。

2.如權(quán)利要求1所述的分離分析方法，其特征在于，所述第一流動相的硼酸濃度為50～150mM，所述水溶性無機鹽的濃度為10～30mM。

3.如權(quán)利要求2所述的分離分析方法，其特征在于，所述第一流動相及第二流動相的硼酸濃度為75～125mM。

4.如權(quán)利要求1～3中的任一項所述的分離分析方法，其特征在于，所述第一流動相及第二流動相的pH為7.5～9.5。

5.如權(quán)利要求1～4中的任一項所述的分離分析方法，其特征在于，所述水溶性無機鹽是氯化鈉。

6.如權(quán)利要求1～5中的任一項所述的分離分析方法，其特征在于，在將所述柱加熱至70℃以下的溫度的狀態(tài)下進行還原糖的分離。

7.如權(quán)利要求1～6中的任一項所述的分離分析方法，其特征在于，所述堿性氨基酸以在所述混合溶液中達(dá)到0.1～2w/v％的濃度的條件添加。

8.如權(quán)利要求1～7中的任一項所述的分離分析方法，其特征在于，所述堿性氨基酸選自精氨酸、賴氨酸和組氨酸。

9.如權(quán)利要求1～8中的任一項所述的分離分析方法，其特征在于，所述規(guī)定溫度的加熱區(qū)域的溫度為140～180℃。

10.如權(quán)利要求1～9中的任一項所述的分離分析方法，其特征在于，所述第二流動相的所述鹽的濃度至少被提高至200mM。

11.如權(quán)利要求1～10中的任一項所述的分離分析方法，其特征在于，還原糖包括中性糖。

12.如權(quán)利要求1～11中的任一項所述的分離分析方法，其特征在于，還原糖包含甘露糖、葡萄糖或巖藻糖。

13.如權(quán)利要求1～12中的任一項所述的分離分析方法，其特征在于，還原糖包含甘露糖-6-磷酸。

14.一種水溶液，其特征在于，用于在權(quán)利要求1～13中的任一項所述的分離分析方法中用作所述第一流動相，含50～150mM硼酸和10～30mM氯化鈉。

15.一種水溶液，其特征在于，用于在權(quán)利要求1～13中的任一項所述的分離分析方法中與所述第一流動相混合來制備所述第二流動相，含50～150mM硼酸和200～250mM氯化鈉。

16.一種固體組合物，其特征在于，用于溶解于水來制備權(quán)利要求14所述的水溶液，以1∶0.1～1∶0.5的摩爾比含有硼酸和氯化鈉。

17.一種固體組合物，其特征在于，用于溶解于水來制備權(quán)利要求15所述的水溶液，以1∶1.5～1∶2.5的摩爾比含有硼酸和氯化鈉。