[發(fā)明專利]檢測(cè)小管福壽螺體內(nèi)廣州管圓線蟲(chóng)的試劑盒及方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201010137439.0
• 申請(qǐng)日: 2010-03-31
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101824474A
• 公開(kāi)（公告）日: 2010-09-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 危芙蓉;張儀;劉和香;周曉農(nóng);呂山;胡玲
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)疾病預(yù)防控制中心寄生蟲(chóng)病預(yù)防控制所
• 主分類(lèi)號(hào): C12Q1/68
• 分類(lèi)號(hào): C12Q1/68
• 代理公司: 上海浦一知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31211
• 代理人: 王函

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物工程領(lǐng)域，尤其一種檢測(cè)試劑盒，具體來(lái)說(shuō)是一種基于PCR技術(shù)檢測(cè)小管福壽螺體內(nèi)廣州管圓線蟲(chóng)的試劑盒，及對(duì)應(yīng)的檢測(cè)方法。

背景技術(shù)

廣州管圓線蟲(chóng)(Angiostrongylus?cantonensis)是1933年由我國(guó)學(xué)者陳心陶在廣東省廣州市黑家鼠(Rattus?rattus)和褐家鼠(R.norvegicus)肺部發(fā)現(xiàn)并命名的，屬圓線蟲(chóng)目(Strongylata)、后圓線蟲(chóng)科(Metastronylidae)、管圓線蟲(chóng)屬(Angiostrongylus)。主要分布在太平洋、印度洋某些島嶼和東南亞國(guó)家。廣州管圓線蟲(chóng)的發(fā)育過(guò)程分為幼蟲(chóng)和成蟲(chóng)階段，幼蟲(chóng)分為I期、II期、III期、IV期和V期幼蟲(chóng)。廣州管圓線蟲(chóng)成蟲(chóng)寄生在鼠肺動(dòng)脈內(nèi)，雌蟲(chóng)產(chǎn)卵于血流中，蟲(chóng)卵隨血流到肺毛細(xì)血管，在末梢動(dòng)脈血管內(nèi)形成栓塞并發(fā)育，成熟后孵出第一期幼蟲(chóng)，幼蟲(chóng)穿過(guò)毛細(xì)血管進(jìn)入肺泡，在呼吸道沿氣管上行到達(dá)咽喉部，再吞入消化道，最后隨糞便排出體外。當(dāng)?shù)谝黄谟紫x(chóng)被軟體動(dòng)物吞食或主動(dòng)鉆入其體內(nèi)而感染發(fā)育成第三期幼蟲(chóng)(感染期幼蟲(chóng))。當(dāng)鼠吞食含感染期幼蟲(chóng)的軟體動(dòng)物或飲用了受污染的水后，幼蟲(chóng)在鼠胃內(nèi)蛻鞘，并進(jìn)入腸壁小血管，經(jīng)肝或淋巴管、胸導(dǎo)管被帶至右心，再經(jīng)肺部血管至左心，由此到達(dá)身體各部器官發(fā)育為成蟲(chóng)并產(chǎn)卵，完成廣州管圓線蟲(chóng)的一個(gè)生活周期。

人類(lèi)多因食用含有第III期活幼蟲(chóng)的淡水螺肉而感染，也可通過(guò)食用轉(zhuǎn)續(xù)宿主如魚(yú)、蝦、蛙等或污染的水及蔬菜等而感染，皮膚接觸也有可能導(dǎo)致感染。當(dāng)有活力的III期幼蟲(chóng)被人誤食，廣州管圓線蟲(chóng)在人體內(nèi)移行，穿過(guò)人體消化道壁進(jìn)入血管，順血流進(jìn)入腦部，引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)的損害和炎癥反應(yīng)。廣州管圓線蟲(chóng)病患者臨床癥狀多數(shù)以中樞神經(jīng)系統(tǒng)損害為主的腦膜腦炎和腦膜炎癥狀，主要表現(xiàn)為急性頭痛、頸項(xiàng)強(qiáng)直、腦膜刺激癥等，嚴(yán)重者亦可引起死亡。

目前，全球報(bào)道病例已超過(guò)2800多例。在我國(guó)大陸第一例廣州管圓線蟲(chóng)病例報(bào)道于1984年，直到1996年只有3例病例。然而，隨著人類(lèi)飲食習(xí)慣的變化，病例數(shù)顯著增加，在過(guò)去的十年里，中國(guó)大陸發(fā)生了9次暴發(fā)，臺(tái)灣3次，尤其是在我國(guó)近期的幾次暴發(fā)中，病例數(shù)超過(guò)300多例。隨著該蟲(chóng)中間宿主的擴(kuò)散蔓延及食用螺肉者增多，發(fā)病人數(shù)呈繼續(xù)增長(zhǎng)的態(tài)勢(shì)，且有從南方沿海向北方蔓延的趨勢(shì)，其蔓延的速度之快引起人們的重視。廣州管圓線蟲(chóng)病已經(jīng)引起了我國(guó)衛(wèi)生部門(mén)和世界衛(wèi)生組織的重視。衛(wèi)生部在2003年將廣州管圓線蟲(chóng)病列為我國(guó)“新發(fā)傳染病”，2005年再一次警告人們警惕包括廣州管圓線蟲(chóng)在內(nèi)的嚴(yán)重威脅人類(lèi)健康的食源性寄生蟲(chóng)病。

從生活史可看出，完成生活史周期必須要以鼠作為終宿主及某些螺類(lèi)作為中間宿主。目前在我國(guó)有報(bào)道的廣州管圓線蟲(chóng)中間宿主有小管福壽螺(Pomacea?canaliculata)、褐云瑪瑙螺、皺疤堅(jiān)螺、短梨巴蝸牛、同型巴蝸牛、中華圓田螺、環(huán)棱螺及蛞蝓等。在眾多中間宿主中，小管福壽螺是廣州管圓線蟲(chóng)的重要中間宿主，其廣州管圓線蟲(chóng)自然感染率最高(65％)，在溫州地區(qū)其自然感染率高至69％。近年來(lái)溫州與福州地區(qū)以及近期北京市廣州管圓線蟲(chóng)病的暴發(fā)均因食用福壽螺引起。小管福壽螺已成為傳播廣州管圓線蟲(chóng)的優(yōu)勢(shì)種群之一。

小管福壽螺為軟體動(dòng)物門(mén)(Mollusca)，腹足綱(Gastropoda)，前腮亞綱(Prosobranchia)，新進(jìn)腹足超目(Caenogastropoda)，中腹足目(Mesogastropoda)，瓶螺超科(Ampullarioidae)，瓶螺科(Ampullariidae)。原產(chǎn)于南美洲亞馬遜河流域，由巴西華僑以高蛋白質(zhì)食物引進(jìn)臺(tái)灣，1981年引入廣東，在該省作為特種經(jīng)濟(jì)作物廣為養(yǎng)殖，后又被引入到其他省份養(yǎng)殖。近十幾年來(lái)，張瑩珍等報(bào)道福州市區(qū)福壽螺的感染率為20.85％(49/235)，林金祥等報(bào)導(dǎo)福建長(zhǎng)樂(lè)福壽螺的感染率為40.0％，羅斌等報(bào)告福州市福壽螺感染率為18.82％，李莉莎等報(bào)告福建省連江南安兩地福壽螺感染率為16.64％，柳堅(jiān)等調(diào)查了海南定安縣的小管福壽螺顯示感染率為7.1％(10/140)，孫慧冰等報(bào)道廣東肇慶市小管福壽螺感染率為10.79％，張志強(qiáng)等報(bào)告茂名市福壽螺的感染率為20.14％，鄧卓暉等報(bào)道廣東省小管福壽螺平均感染率為5.9％(172/2929)。