[發(fā)明專利]用αD珠蛋白基因作為雞的高載氧能力的分子標(biāo)記及其檢測(cè)方法與應(yīng)用

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201010134700.1
• 申請(qǐng)日: 2010-03-29
• 公開（公告）號(hào): CN101824414A
• 公開（公告）日: 2010-09-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 茍瀟;吳常信;楊舒黎;張浩;魏澤輝;嚴(yán)達(dá)偉;趙桂英;韓樹鑫;李帥
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 云南農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N15/12
• 分類號(hào): C12N15/12;C12N15/11;C12N15/10;C12Q1/68
• 代理公司: 昆明今威專利代理有限公司 53115
• 代理人: 康珉

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于雞遺傳(分子)標(biāo)記輔助選擇技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種雞高原低氧適應(yīng)的分子標(biāo)記及其引物，以及用該分子標(biāo)記檢測(cè)雞的高載氧能力的方法及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

藏雞是世界上適應(yīng)高原時(shí)間最長(zhǎng)、適應(yīng)能力最強(qiáng)的相對(duì)比較封閉的雞品種，已首批列入受保護(hù)的畜禽品種資源當(dāng)中。藏雞是指來自于藏區(qū)唯一的土著品種。藏雞具有適應(yīng)性強(qiáng)、耐粗飼、野外覓食能力強(qiáng)、抗病力強(qiáng)等特點(diǎn)。藏雞對(duì)高原的適應(yīng)是多層次、多環(huán)節(jié)適應(yīng)，突出表現(xiàn)為其胚胎低氧適應(yīng)能力遠(yuǎn)高于低地雞。高原低氧條件下，采用自然孵化方式進(jìn)行繁殖，種蛋受精率平均為89.37％，受精蛋孵化率為86.63％(張浩等.藏雞及其與低地雞種雜交組合生長(zhǎng)曲線擬合與分析.中國(guó)畜牧雜志，2005，10：109-114)。低地雞是指除藏雞以外的雞種。低地雞模擬高海拔孵化結(jié)果顯示4000米以上海拔孵化率接近零(Visschedijk?A?HJ.Effects?of?barometric?pressure?and?abnormal?gas?mixtures?on?gaseousexchange?by?the?avian?embryo.Am.Zool，1980，20：469-476)，而藏雞孵化率能達(dá)到70％-80％。13.0％氧濃度低氧模擬孵化結(jié)果顯示藏雞孵化率仍能達(dá)到35.0％，而低地雞品種(北京油雞，隱性白羽肉雞)只有3.0％(張浩等.小型蛋雞及其雜交種蛋高海拔孵化性能研究.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)，2006，39：1507-1510)。因此藏雞是胚胎耐低氧分子機(jī)制研究的絕好模型。

突變型血紅蛋白造成其血氧親和力增高是許多高原鳥類適應(yīng)高原低氧環(huán)境的重要分子機(jī)制。斑頭雁(bar-headed?goose，Anser?indicus)是一種最典型的耐低氧鳥類。研究發(fā)現(xiàn)突變Pro-119α(H2)-Ala造成了斑頭雁血紅蛋白高的血氧親和力，因?yàn)樵撏蛔兪谴蟀被嶙優(yōu)樾“被幔斐闪甩?sub>1β₁界面兩個(gè)碳原子大小的間隙，有利于提高T態(tài)結(jié)構(gòu)氧親和力，但對(duì)R態(tài)結(jié)構(gòu)不發(fā)生變化(PerutzM.F.Species?adaptation?in?a?protein?molecule.Mol.Chem.Hoppe-Seyler，1983，370：699-706)。安第斯雁(Andean?goose，Chloephaga?melanoptera)生活在南美海拔5000-6000米高原，其血紅蛋白突變機(jī)制與斑頭雁一致(Jessen，T.H.，et?al.，Adaptation?of?bird?haemoglobin?to?high?altitudes：demonsration?of?molecular?mechanism?by?protein?engineering.Proc.Natl.Acad.Sci.USA，1991，88：6519-6522)。鳳頭潛鴨(Tufted?duck，Aythyafuligula)其深水耐低氧機(jī)制是因?yàn)檠t蛋白Lys-α99-Arg突變提高了血氧親和力(Abbasi?A.，et?al.Molecular?basis?of?bird?respiration：primaryhemoglobin?structure?component?from?Tufted?Duck?role?of?α99Arg?information?of?a?complex?salt?bridge?network.Biochemical?and?BiophysicalResearch?Communications，2002，291：1769-84)。隨后研究又指出其HbD?a^D34Val、a^D38Gln及a^D94Asp可能也是低氧適應(yīng)的原因之一(Lutfullah?G.et?al.Molecular?mechanism?of?high?altitude?respiration：primary?structure?ofa?minor?hemoglobin?component?from?Tufted?duck(Aythya?fuligula.Anseriformes).Biochem.Biophy.Res.Commun.2005，326：123~130)。白頭禿鷲(White-headed?Vulture)和歐洲黑禿鷲(Black?Vulture)HbD?α^D鏈與β鏈氨基酸序列完全相同，因而出現(xiàn)自然界中不多見的四亞基相同的Hb，此種HbD比HbA具有更高的氧親和力(Hiebl?I.，et?al.High-altituderespiration?of?falconiformes.The?primary?structures?and?functionalproperties?of?the?major?and?minor?hemoglobin?components?of?the?adultWhite-Headed?Vulture.J.Chem.Hoppe-Seyler，1989，370：699~706)。