[發(fā)明專利]一種油葵的基因轉(zhuǎn)化方法無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201010134462.4 | 申請日： | 2010-03-29 |
| 公開（公告）號： | CN101787372A | 公開（公告）日： | 2010-07-28 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 楊靜慧;劉艷軍;張偉玉 | 申請（專利權(quán)）人： | 天津農(nóng)學(xué)院 |
| 主分類號： | C12N15/82 | 分類號： | C12N15/82;A01H4/00;A01H5/00 |
| 代理公司： | 天津盛理知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 12209 | 代理人： | 王來佳 |
| 地址： | 300384*** | 國省代碼： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 基因 轉(zhuǎn)化 方法 | ||
1.一種油葵的基因轉(zhuǎn)化方法，其特征在于：其轉(zhuǎn)化方法的步驟是：
(1)取油葵試管苗組織作為外植體；
(2)取農(nóng)桿菌C58C1的一個單菌落，接種到LB液體培養(yǎng)基中過夜振蕩培養(yǎng)，待其OD值為0.2-0.6時(shí)，取出并浸染油葵試管苗組織外植體；
(3)將上述浸染過的油葵試管苗外植體放在含有2-5mg/L除草劑的分化培養(yǎng)基上進(jìn)行再生芽的誘導(dǎo)，該分化培養(yǎng)基為MS+KT0.25mg/L+IAA0.5mg/L，外植體長度為2-3cm，接種50-150塊，培養(yǎng)條件為20-30℃、20-26h光照、光強(qiáng)1500-2500lx，從接種后每0-14天繼代一次，生成轉(zhuǎn)化苗；
(4)將上述除草劑篩選的轉(zhuǎn)化苗轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基，其生根培養(yǎng)基的構(gòu)成為1/2MS+IAA0.5mg/L，待轉(zhuǎn)化苗苗長到2-5cm高時(shí)即可移栽到花盆中。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種油葵的基因轉(zhuǎn)化方法，其特征在于：所述接種后最佳時(shí)間為每7天繼代一次。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種油葵的基因轉(zhuǎn)化方法，其特征在于：所述分化培養(yǎng)基上的除草劑濃度最佳為3mg/L。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種油葵的基因轉(zhuǎn)化方法，其特征在于：所述油葵試管苗組織外植體最佳為莖段部分。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種油葵的基因轉(zhuǎn)化方法，其特征在于：所述除草劑為草丁膦。
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