[發(fā)明專利]苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)溶液制備方法、確定該標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)準(zhǔn)曲線的方法及檢測(cè)奶酪中其含量的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201010134417.9
• 申請(qǐng)日: 2010-03-29
• 公開（公告）號(hào): CN101806682A
• 公開（公告）日: 2010-08-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 胡桂林;趙源;常建軍;劉曉川;李梅;劉衛(wèi)星
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 內(nèi)蒙古蒙牛乳業(yè)(集團(tuán))股份有限公司
• 主分類號(hào): G01N1/28
• 分類號(hào): G01N1/28;G01N30/02;G01N30/72;G01N30/06
• 代理公司: 北京漢德知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11328
• 代理人: 莊一方;汪愷

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及化學(xué)成份的檢測(cè)的技術(shù)領(lǐng)域，具體來(lái)說(shuō)，它涉及一種苯甲酸 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備方法，一種用具有不同苯甲酸含量的一系列苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)溶液 確定苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)準(zhǔn)曲線的方法，和一種根據(jù)確定的苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo) 準(zhǔn)曲線檢測(cè)奶酪中苯甲酸含量的方法。

背景技術(shù)

苯甲酸(又稱安息香酸)是一種常用的食品防腐劑，與其鈉鹽的防腐效果相 同，它對(duì)多種微生物細(xì)胞的呼吸酶系的活性有抑制作用，并對(duì)微生物的細(xì)胞 膜生長(zhǎng)有阻礙作用，從而達(dá)到抑制微生物的繁殖。由于它既能抑制多種微生 物的繁殖，又具有很好的殺菌作用，被廣泛用于罐頭、果醬、醬油、食醋、 汽水以及各類肉食品中。苯甲酸是各國(guó)允許使用，而且歷史比較悠久的食品 防腐劑。

當(dāng)苯甲酸進(jìn)入人體后，會(huì)與人體內(nèi)氨基乙酸(甘氨酸)和葡萄糖酸分別反應(yīng) 生成馬尿酸和葡萄糖苷酸，后者會(huì)隨尿排出體外，所以每日攝取少量苯甲酸 不會(huì)對(duì)人體形成危害。但是攝入過(guò)量的苯甲酸時(shí)，卻會(huì)對(duì)人體肝臟造成危害。 因?yàn)楸郊姿岬慕涠痉磻?yīng)是在肝臟中進(jìn)行的，對(duì)肝功能衰弱的人即使攝取少量 苯甲酸也會(huì)使病情加重，苯甲酸對(duì)皮膚、眼睛和粘膜也有一定的刺激性，苯 甲酸鈉可引起腸道不適。聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織(FAO)和世界衛(wèi)生組織(WHO)試驗(yàn)研 究后規(guī)定人體對(duì)苯甲酸的每日攝入量為5-10mg/kg，我國(guó)也對(duì)各類食品中苯甲 酸的最大使用量作了規(guī)定。

國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《GB/T?21703-2008乳與乳制品中苯甲酸和山梨酸的測(cè)定》中用 液相色譜法來(lái)測(cè)定苯甲酸的含量。該方法的前處理為先在150ml錐形瓶中稱 取液體乳20g，或者在150ml錐形瓶中稱取固體樣品3g，加10ml水全部溶解。 然后加入25ml?0.1mol/L氫氧化鈉溶液，在70℃水浴中處理15分鐘。冷卻后， 加適量甲醇轉(zhuǎn)移至100ml容量瓶中。用0.5moll硫酸溶液將pH調(diào)節(jié)到8，然 后加人2ml?92g/L亞鐵氰化鉀溶液和2ml?183g/l乙酸鋅溶液。劇烈振搖，靜置 15分鐘，混合后冷卻到室溫，再用甲醇定容，靜置15分鐘，上清液經(jīng)過(guò)濾 膜過(guò)濾。收集濾液作為試樣溶液，用于高效液相色譜儀測(cè)定。

該方法需要使用用甲醇45ml-65ml，會(huì)對(duì)環(huán)境造成一定污染，同時(shí)處理樣 品時(shí)間長(zhǎng)，操作較為復(fù)雜。

該方法通常是先對(duì)具有確定苯甲酸含量的工作液進(jìn)行標(biāo)定，然后再用同 樣的方法處理和測(cè)試被測(cè)樣品，根據(jù)這兩次測(cè)量的結(jié)果來(lái)推算被測(cè)樣品中的 苯甲酸含量。但這方法測(cè)量精度不高，由于一次測(cè)量的數(shù)值可能會(huì)受到一些 不確定因素的干擾，因此根據(jù)該工作液的數(shù)值確定的樣品苯甲酸含量可能并 不準(zhǔn)確。

另外，在《氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法測(cè)定奶粉中苯甲酸(鈉)含量》(《化學(xué) 測(cè)定方法》，2008年第18卷第1期，第75-76，甘平勝，黃聰，于鴻，候建榮) 中公開了一種用氣相色譜-質(zhì)譜法檢測(cè)苯甲酸含量的方法，但該方法只檢測(cè)奶 粉樣品，沒有提及實(shí)驗(yàn)時(shí)所用定性離子、定量離子。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備方法，該方法操作簡(jiǎn)便 且具有較高精度。

本發(fā)明還提供了一種苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)準(zhǔn)曲線的確定方法，它可以用上 述苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備方法配備具有不同苯甲酸含量的標(biāo)準(zhǔn)工作液，并采 用氣相色譜-質(zhì)譜法以準(zhǔn)確確定苯甲酸含量與峰面積之間的對(duì)應(yīng)關(guān)系。

本發(fā)明又提供了一種檢測(cè)乳與奶酪中苯甲酸含量的方法，它采用氣相色 譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法檢測(cè)奶酪樣品中的苯甲酸，根據(jù)上述的苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)曲線確定奶 酪中的苯甲酸含量，并提高檢測(cè)時(shí)的抗干擾能力。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了一種苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備方法，該方 法包括如下步驟：

1)取20.0μg/ml的苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)工作液1mL到一個(gè)10-15ml的離心管中；

2)在該離心管中加入蒸餾水至5ml，再加入1mL鹽酸溶液(6mol/L)和 2ml二氯甲烷，用旋渦混合器混合1分鐘，用離心機(jī)在3000rpm-4000rpm 條件下離心5-10分鐘；

3)用1ml注射器吸取下清液經(jīng)過(guò)過(guò)濾膜過(guò)濾到進(jìn)樣小瓶，此即為制得待 測(cè)的苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)溶液。

本發(fā)明還提出了一種根據(jù)上述苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)溶液制備方法確定苯甲酸標(biāo)準(zhǔn) 溶液標(biāo)準(zhǔn)曲線的方法，該方法包括：

1)制備具有不同苯甲酸含量的苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)溶液；

2)用氣相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法分別標(biāo)定上述步驟1)制備的不同濃度的苯甲 酸標(biāo)準(zhǔn)溶液；