[發明專利]一種促性腺激素的純化方法

有效

• 申請號: 201010132785.X
• 申請日: 2010-03-12
• 公開（公告）號: CN101792482A
• 公開（公告）日: 2010-08-04
• 發明（設計）人: 萬龍巖;周金
• 申請（專利權）人: 麗珠醫藥集團股份有限公司;上海麗珠制藥有限公司
• 主分類號: C07K1/36
• 分類號: C07K1/36;C07K1/30;C07K1/18;C07K14/59
• 代理公司: 北京泛華偉業知識產權代理有限公司 11280
• 代理人: 郭廣迅;曹津燕

1.一種從絕經婦女的尿液中提取的促性腺激素的純化方法，包括以下 步驟：

（1）將尿促性腺激素粗品以溶液A溶解后加入硅酸鋁粉末進行吸附， 離心得沉淀以溶液A洗滌；再以溶液B洗脫沉淀，洗脫液過濾后加入乙醇 進行沉淀，干燥沉淀得中間體I；

（2）將中間體I以溶液C溶解，將得到的溶液經DEAE陰離子交換 樹脂進行層析，以溶液D洗脫，洗脫液中加入乙醇進行沉淀，干燥沉淀得 中間體II；

（3）將中間體II以溶液B溶解，先后加入溶液E和溶液F除熱原， 再加入乙醇進行沉淀，干燥沉淀，分裝得成品；

其中所述溶液A為0.05-0.08mol/L醋酸鈉緩沖液，以冰醋酸調節pH 至4.5-5.5；溶液B為含有8-12重量%乙酸銨的20-60體積%乙醇水溶液； 溶液C為0.05-0.07mol/L的三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽緩沖液，以鹽酸調節 pH至6-8；溶液D為0.2-0.3mol/L的三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽緩沖液，以 鹽酸調節pH至6-8；溶液E為0.1-0.3mol/L磷酸鈉溶液；溶液F為 0.2-0.4mol/L的醋酸鈣溶液。

2.根據權利要求1所述的純化方法，其中，在步驟（1）中，所述洗 脫液過濾的方式為抽濾。

3.根據權利要求1或2所述的純化方法，其中，在步驟（1）中，所 述洗脫液過濾的方式為抽濾后用1萬分子量的膜超濾。

4.根據權利要求1所述的純化方法，其中，在步驟（2）中，在DEAE 陰離子交換樹脂層析時先用溶液C洗滌完畢后再用溶液D進行洗脫。

5.根據權利要求1或4所述的純化方法，其中，所述DEAE陰離子交 換樹脂為DE-23陰離子交換樹脂。

6.根據權利要求1所述的純化方法，其中，在步驟（3）中，除熱原 操作為在中速攪拌下，緩慢加入溶液E，攪拌后再滴加溶液F，用5-10mol/L 氫氧化鈉調pH至7.5-8.0，攪拌后離心，上清液再緩慢加入溶液E，攪拌 后再滴加溶液F，攪拌后用5-10mol/L氫氧化鈉調pH至7.5-8.0，離心后 上清液用冰醋酸調整pH至6.5-7.5。

7.根據權利要求1或6所述的純化方法，其中，在步驟（3）中，所 述除熱原，分裝操作均在十萬級潔凈區域內進行。

8.根據權利要求1所述的純化方法，其中，在步驟（1）至（3）中， 沉淀用乙醇均為95體積%的藥用級乙醇。

9.根據權利要求1所述的純化方法，其中，在步驟（1）至（3）中， 沉淀干燥前用無水乙醇進行脫水。

10.根據權利要求1所述的純化方法，其中，在步驟（1）至（3）中， 干燥操作均采用真空干燥。

11.根據權利要求10所述的純化方法，其中，所述干燥操作均采用在 五氧化二磷存在條件下的真空干燥。