[發明專利]一種重組耐熱醛縮酶基因工程菌及其應用

有效

• 申請號: 201010131009.8
• 申請日: 2010-03-23
• 公開（公告）號: CN102329764A
• 公開（公告）日: 2012-01-25
• 發明（設計）人: 謝恬;裴曉林;王秋巖;黃黎鋒;李誠璐;謝開林
• 申請（專利權）人: 杭州師范大學
• 主分類號: C12N1/21
• 分類號: C12N1/21;C12N15/60;C12N15/63;C12N9/88;C12R1/19
• 代理公司: 杭州天正專利事務所有限公司 33201
• 代理人: 黃美娟;冷紅梅

1.一種重組耐熱醛縮酶基因工程菌，由如下方法獲得：構建含有醛縮酶基因(Dera)序列的重組質粒，將重組質粒轉化至宿主細胞中，篩選陽性克隆，獲得重組耐熱醛縮酶基因工程菌。

2.如權利要求1所述的基因工程菌，其特征在于所述醛縮酶基因(Dera)序列如下：

ATGTCCGAAAGCTTCTTCTGTCGCTTCGGCGTGTCTGAAATCGCGTCCCGTATCGACCAC

GCCGTTCTGAAACCGTGGAGCTCCGTTTCTGAACTGGAAAAAGCAATCCGTGAGCTGGA

GGAACTGAACCTGCGTTGCCTGATCATCAGCCCAACTCATCTGCGTCTGGCTCGCGAAAA

AACTAATAAATGTCTGGGCGTTGTGGTAGGTTTCCCATTTGGTTATTCTACTATCGAGGCG

AAAATCAAGGAACTGGAAGATTCTATCGCACTGGGTGCTCAGGAAATCGACTACGTGGC

CAACACTCAGCTGCTGCTGGCAGGCCGTACCGAAGAATACCTGAACGAAATTCGCGCTG

CGATCACCATTTGCCGTGACTCCGGCGTTAAATGCAAGGTAATCATTGAGGCTCCGGCGC

TGCCGCGTAACCTGCTGGTTGAAATCGTAGAGAAAATTGCAATGATGGATCCGCACCCAG

ATTACATTAAAACCAGCACCGGTTACGGTCCGCGTCCGACCTATGTTGAGGATGTTTACCT

GATCGATCAAACCCTGCGTCGTATCGGCAAGCGCGACGAAATCGGTATCAAAGCGGCTGG

TGGCATTCGCGAAGGCCTGCAGGCAGCTGCGATGCTGCTGGCGGGTGCCGACGTACG

GTACCTCTACCCCGCGCCAGGTGATTGAAACCTATAAAGAACTGTGCCGTATTTAA。

3.如權利要求1所述的基因工程菌，其特征在于所述基因工程菌由如下方法獲得：對醛縮酶基因(Dera)進行修飾，獲得帶有雙限制性酶切位點的目的序列，將該目的序列連接到表達載體中，獲得重組質粒，將重組質粒轉化至宿主細胞中，篩選陽性克隆，獲得重組耐熱醛縮酶基因工程菌；所述目的序列如下，下劃線部分為酶切位點：

TCTAGAATGTCCGAAAGCTTCTTCTGTCGCTTCGGCGTGTCTGAAATCGCGTCCCGTATCG

ACCACGCCGTTCTGAAACCGTGGAGCTCCGTTTCTGAACTGGAAAAAGCAATCCGTGAG

CTGGAGGAACTGAACCTGCGTTGCCTGATCATCAGCCCAACTCATCTGCGTCTGGCTCGC

GAAAAAACTAATAAATGTCTGGGCGTTGTGGTAGGTTTCCCATTTGGTTATTCTACTATCG

AGGCGAAAATCAAGGAACTGGAAGATTCTATCGCACTGGGTGCTCAGGAAATCGACTAC

GTGGCCAACACTCAGCTGCTGCTGGCAGGCCGTACCGAAGAATACCTGAACGAAATTCG

CGCTGCGATCACCATTTGCCGTGACTCCGGCGTTAAATGCAAGGTAATCATTGAGGCTCC

GGCGCTGCCGCGTAACCTGCTGGTTGAAATCGTAGAGAAAATTGCAATGATGGATCCGCA

CCCAGATTACATTAAAACCAGCACCGGTTACGGTCCGCGTCCGACCTATGTTGAGGATGT

TTACCTGATCGATCAAACCCTGCGTCGTATCGGCAAGCGCGACGAAATCGGTATCAAAGC

GGCTGGTGGCATTCGCGAAGGCCTGCAGGCAGCTGCGATGCTGCTGGCGGGTGCCGACG

TTATCGGTACCTCTACCCCGCGCCAGGTGATTGAAACCTATAAAGAACTGTGCCGTATTTA

ACTCGAG。