[發(fā)明專利]一種所羅門姜黃的組織培養(yǎng)繁殖方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201010127400.0
• 申請(qǐng)日: 2010-03-16
• 公開（公告）號(hào): CN102187810A
• 公開（公告）日: 2011-09-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 吳國江;張施君;劉念;盛愛武
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院華南植物園
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 廣州科粵專利商標(biāo)代理有限公司 44001
• 代理人: 余炳和

技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明涉及所羅門姜黃的繁殖栽培方法，具體來說是利用組織培養(yǎng)技術(shù)繁殖所羅門姜黃的方法。

背景技術(shù)：

所羅門姜黃(Curcuma?soloensis?Voel.)，姜科姜黃屬，多年生球根草本花卉。原產(chǎn)所羅門群島，我國廣東已引種栽培，在華南地區(qū)種植時(shí)表現(xiàn)良好。

所羅門姜黃株高30～80厘米，植株叢生，葉片長橢圓形，綠色，可盆栽或地栽作觀葉植物觀賞。花期4～10月，圓柱形的穗狀花序從根狀莖抽出，花序具有密集的苞片，上部苞片紫紅色，下部苞片綠色；苞片在花序上排列緊密，艷麗而持續(xù)時(shí)間長，可作花境、花壇布置。此外，所羅門姜黃也是切花的優(yōu)雅花材，瓶插壽命可達(dá)15-20天，極具觀賞性。所羅門姜黃在廣東引種已初步獲得成功，其繁殖技術(shù)通常采用分切根狀莖繁殖。在秋末或冬季選擇飽滿而多芽的根狀莖，貯藏于沙中越冬。次年3-4月取出，將根狀莖分切成2-3塊種植，應(yīng)保證每塊均帶有芽才能長成新植株。采用根狀莖繁殖，不僅受季節(jié)限制，而且繁殖系數(shù)低，每年只可獲得2-3倍的增殖率，生產(chǎn)規(guī)模難以擴(kuò)大，故難以在花卉市場占據(jù)一席之地。

發(fā)明內(nèi)容：

本發(fā)明的目的是提供一種能高效繁殖所羅門姜黃的組織培養(yǎng)繁殖方法。

本發(fā)明利用植物組織細(xì)胞的全能性和植物組織培養(yǎng)技術(shù)，經(jīng)過外植體的取材、消毒、離體培養(yǎng)、出瓶移栽和日常栽培管理，而獲得所羅門姜黃植株，試管苗栽培6-8個(gè)月后即可開花，從而實(shí)現(xiàn)了本發(fā)明的目的。

本發(fā)明的所羅門姜黃的組織培養(yǎng)繁殖方法，包括以下的步驟：

a)外植體的誘導(dǎo)和不定芽誘導(dǎo)：將所羅門姜黃的根狀莖用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1-0.2％的多菌靈溶液中浸泡10-20分鐘，取出后用濕沙包埋，在28～30℃下黑暗條件下培養(yǎng)10～15天，取萌發(fā)出的新芽，切去葉片，保留長0.5-2厘米的芽作為外植體，外植體消毒后接種到芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為溫度26-30℃，光照度1500～2000lx，光照時(shí)間12～24小時(shí)/天，培養(yǎng)20-30天后誘導(dǎo)出不定芽；

b)不定芽繼代增殖：將步驟(1)誘導(dǎo)出的不定芽切割后繼代培養(yǎng)于芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，培養(yǎng)條件為溫度26-30℃，光照度1500～2000lx，光照時(shí)間12～24小時(shí)/天，進(jìn)行不定芽的增殖；

c)生根培養(yǎng)：將生長到3～5厘米高的不定芽切出轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基中進(jìn)行壯苗和生根培養(yǎng)形成試管苗，培養(yǎng)條件為溫度26-30℃，光照度1500～2000lx，光照時(shí)間12～24小時(shí)/天；

d)試管苗移栽：當(dāng)試管苗長至5-8厘米時(shí)，洗掉根部培養(yǎng)基，栽入由沙、泥炭土按質(zhì)量比1～2∶3比例混合成的基質(zhì)中，常規(guī)培養(yǎng)后即獲得所羅門姜黃植株；

所述的芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基每升含6-芐基腺嘌呤5-10毫克、吲哚乙酸0.01-0.1毫克，蔗糖30克，常規(guī)量的瓊脂，pH?5.7-5.8，其余為MS培養(yǎng)基的成份。

所述的生根培養(yǎng)基每升含有蔗糖15-30克，常規(guī)量的瓊脂，pH?5.7-5.8，其余為MS培養(yǎng)基的成份。

步驟a)中所述的根狀莖在黑暗條件下培養(yǎng)10～15天，這是因?yàn)楦鶢钋o生長在地下，附生著較多的微生物，如果直接對(duì)根狀莖消毒，很難消毒徹底，污染率高達(dá)80-90％。因此先把根狀莖放在黑暗條件下生長，使芽盡量伸長，可使芽遠(yuǎn)離根狀莖；隨后切去芽頂端長出的葉片，保留約0.5-2cm長的芽段作為外植體進(jìn)行消毒，可大大增強(qiáng)消毒效果，污染率可降低至20-30％。

在步驟a)中，所述的外植體消毒，可應(yīng)用常規(guī)的方法對(duì)外植體消毒，一般采用體積分?jǐn)?shù)為70-75％酒精浸泡20～30秒，用無菌水沖洗一遍，洗凈，然后用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1-0.2％的升汞溶液消毒10-15分鐘或者體積分?jǐn)?shù)為2-10％次氯酸鈉溶液中消毒20-30分鐘，再用無菌水沖洗4-8遍，洗凈。

在不定芽繼代增殖中，20～30天可完成1個(gè)繼代周期，每1個(gè)繼代增殖周期可由1個(gè)芽增殖形成5-10個(gè)芽，增殖倍數(shù)為5-10倍，能進(jìn)行多次繼代，繼代10次以上仍然能保持穩(wěn)定的增殖率。由于所羅門姜黃是喜光植物，每天的光照時(shí)間保持12小時(shí)以上，若想加快芽的生長，可取消黑暗條件，進(jìn)行24小時(shí)全光照，則繼代周期可縮短至20天。

在生根培養(yǎng)步驟中，不定芽可在1個(gè)月內(nèi)伸長至6厘米以上，同時(shí)有大量白色的不定根發(fā)生，生根率可達(dá)100％，根長可達(dá)2厘米以上。本發(fā)明在生根培養(yǎng)基中無需加入生長調(diào)節(jié)劑，不定芽生根培養(yǎng)30天后，每株苗的根數(shù)可達(dá)5條以上。