[發明專利]測定銀杏葉或其相關制劑中槲皮素對香豆?;咸烟鞘罄钐擒蘸康姆椒?/span>有效
| 申請號: | 201010122691.4 | 申請日: | 2010-03-11 |
| 公開(公告)號: | CN101810650A | 公開(公告)日: | 2010-08-25 |
| 發明(設計)人: | 王京輝;陳有根;付欣彤;王志斌;郭洪祝 | 申請(專利權)人: | 北京市藥品檢驗所 |
| 主分類號: | A61K36/16 | 分類號: | A61K36/16;A61P11/06;A61P9/06;G01N30/36;A61K127/00 |
| 代理公司: | 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245 | 代理人: | 關暢 |
| 地址: | 100035 北*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 測定 銀杏葉 相關 制劑 中槲皮素 香豆?;?/a> 葡萄糖 糖苷 含量 方法 | ||
1.一種測定銀杏葉或其相關制劑中槲皮素對香豆?;咸烟鞘罄钐擒蘸康姆? 法,包括如下步驟:
在無陰性干擾的情況下,以槲皮素對香豆?;咸烟鞘罄钐擒諡閷φ掌?,利用高 效液相色譜對作為供試品的所述銀杏葉或其相關制劑中的槲皮素對香豆?;咸烟鞘? 李糖苷進行測定,由外標法計算得到所述銀杏葉或其相關制劑中槲皮素對香豆?;? 萄糖鼠李糖苷的含量;
在所述測定之前,先將所述對照品和所述供試品分別溶于溶劑中,分別得到對照 品溶液和供試品溶液;溶解所述對照品的溶劑選自甲醇、甲醇的水溶液、乙醇、乙醇 的水溶液和流動相中的任意一種;溶解所述供試品的溶劑選自甲醇、甲醇的水溶液、 乙醇、乙醇的水溶液和流動相中的任意一種;
所述對照品溶液的濃度為每1ml所述對照品溶液中含有0.001-0.10mg所述對照品;
所述流動相為乙腈的水溶液或所述乙腈的水溶液與修飾劑、緩沖溶液、離子抑制 劑和pH值調節劑中的至少一種組成的混合液;
所述修飾劑選自四氫呋喃、異丙醇和二氧六環中的任意一種;
所述緩沖溶液選自磷酸鹽緩沖溶液、乙酸鹽緩沖溶液和檸檬酸鹽緩沖溶液中的任 意一種;
所述離子抑制劑選自十二烷基磺酸鈉、十一烷基磺酸鈉、己烷磺酸鈉、庚烷磺酸 鈉、辛烷磺酸鈉和壬烷磺酸鈉中的任意一種;
所述pH值調節劑選自甲酸、乙酸、磷酸和檸檬酸中的任意一種;
所述修飾劑的加入量為所述乙腈的水溶液體積的0.5%~10.0%;
所述緩沖溶液的加入量為所述乙腈的水溶液體積的0.5%~10.0%;
所述離子抑制劑的加入量為所述乙腈的水溶液體積的0.1%~3.0%;
所述pH值調節劑的加入量為所述乙腈的水溶液體積的0.05%~5.0%;
所述測定步驟中,檢測波長為360nm;
所述流動相為乙腈的水溶液時,所述測定步驟中的梯度洗脫如下梯度洗脫條件a 或梯度洗脫條件b,其中,所述梯度洗脫條件a如下:
在第0min起至12分鐘起,所述流動相中乙腈的體積百分比為14%,質量百分濃 度為0.4%的磷酸水溶液的體積百分比為86%;
在第12min起至17分鐘起,所述流動相中乙腈的體積百分比由14%變為16%, 質量百分濃度為0.4%的磷酸水溶液的體積百分比由86%變為84%;
在第17min起至24分鐘起,所述流動相中乙腈的體積百分比由16%變為20%, 質量百分濃度為0.4%的磷酸水溶液的體積百分比由84%變為80%;
在第24min起至26分鐘起,所述流動相中乙腈的體積百分比由20%變為21%, 質量百分濃度為0.4%的磷酸水溶液的體積百分比由80%變為79%;
在第26min起至40分鐘起,所述流動相中乙腈的體積百分比為21%,質量百分 濃度為0.4%的磷酸水溶液的體積百分比為79%;
在第40min起至40.01分鐘起,所述流動相中乙腈的體積百分比由21%變為14%, 質量百分濃度為0.4%的磷酸水溶液的體積百分比由79%變為86%;
所述梯度洗脫條件b如下:
在第0min起至8分鐘起,所述流動相中乙腈的體積百分比為15%,質量百分濃 度為0.4%的磷酸水溶液的體積百分比為85%;
在第8min起至17分鐘起,所述流動相中乙腈的體積百分比由15%變為17%,質 量百分濃度為0.4%的磷酸水溶液的體積百分比由85%變為83%;
在第17min起至25分鐘起,所述流動相中乙腈的體積百分比為17%,質量百分 濃度為0.4%的磷酸水溶液的體積百分比為83%;
在第25min起至34分鐘起,所述流動相中乙腈的體積百分比由17%變為20%, 質量百分濃度為0.4%的磷酸水溶液的體積百分比由83%變為80%;
在第34min起至40分鐘起,所述流動相中乙腈的體積百分比為20%,質量百分 濃度為0.4%的磷酸水溶液的體積百分比為80%;
在第40min起至70分鐘起,所述流動相中乙腈的體積百分比由20%變為35%, 質量百分濃度為0.4%的磷酸水溶液的體積百分比由80%變為65%;
在第70min起至70.01分鐘起,所述流動相中乙腈的體積百分比由35%變為15%, 質量百分濃度為0.4%的磷酸水溶液的體積百分比由65%變為85%;
所述流動相為由流動相A和流動相B組成時,所述測定步驟的梯度洗脫條件如下:
其中,所述流動相A為由水、乙腈、異丙醇和檸檬酸以體積比1000:470:50: 6.08混合而得的混合液,所述流動相B為水、乙腈、異丙醇和檸檬酸以體積比1400: 200:30:6.88混合而得的混合液;
在第0min起至10分鐘起,所述流動相中流動相A的體積百分比為10%,流動相 B的體積百分比為90%;
在第10min起至30分鐘起,所述流動相中流動相A的體積百分比由10%變為25%, 流動相B的體積百分比由90%變為75%;
在第30min起至45分鐘起,所述流動相中流動相A的體積百分比為25%,流動 相B的體積百分比為75%;
在第45min起至80分鐘起,所述流動相中流動相A的體積百分比為由25%變為 70%,流動相B的體積百分比由75%變為30%;
在第80min起至100分鐘起,所述流動相中流動相A的體積百分比由70%變為 100%,流動相B的體積百分比由30%變為0;
在第100min起至100.01分鐘起,所述流動相中流動相A的體積百分比由100% 變為10%,流動相B的體積百分比由0變為90%。
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