[發(fā)明專利]一種富硒酵母培養(yǎng)物的生產方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201010122271.6
• 申請日: 2010-02-10
• 公開（公告）號: CN101792720A
• 公開（公告）日: 2010-08-04
• 發(fā)明（設計）人: 潘軍
• 申請（專利權）人: 廣州市博善生物飼料有限公司
• 主分類號: C12N1/18
• 分類號: C12N1/18;C12N1/16;A23K1/16;C12R1/74;C12R1/865
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 李進;黃可峻

技術領域

本發(fā)明涉及微生物培養(yǎng)物及其微生物發(fā)酵方法，具體地說涉及一 種富硒酵母培養(yǎng)物的生產方法。

背景技術

硒是動物必需的微量元素。由于無機硒具有毒性，利用率低，出 于環(huán)保要求，添加量受到限制，提倡使用有機硒。目前有機硒主要有 硒代蛋氨酸，納米硒和酵母硒。酵母硒是將酵母細胞培養(yǎng)在含無機硒 培養(yǎng)基中，通過生物轉化將無機硒轉變成有機硒而得到的。主要結合 形式包括取代含硫氨基酸中的硫以及以共價鍵同肽、蛋白結合，少量 同多糖結合。

目前國際上酵母硒產品，多通過液體發(fā)酵、固體吸附方法進行生 產。該類方法存在以下不足：(1)酵母發(fā)酵生成的益生成分有限；(2) 投資額度大；(3)無機硒的轉化率較低，因而生產成本高；(4)存在廢 液廢渣排放的問題，有必要加以進一步改進。

CN1836545涉及富硒禽飼料制備方法，特征在于如何使用酵母 硒，并未涉及發(fā)酵方法；CN101139554涉及中草藥酵母硒的固態(tài)發(fā)酵 制備方法，特征在于結合中草藥固體發(fā)酵，重點在中草藥，很難保證 獲得穩(wěn)定的硒轉化率；CN1618316涉及奶牛熱應激緩解劑及其制備方 法和應用，特征在于如何使用酵母硒，并未涉及發(fā)酵方法。

本發(fā)明采取的方法是在液體發(fā)酵的基礎上，引入固體發(fā)酵，采用 液體與固體兩相發(fā)酵方法，在固體發(fā)酵階段對富硒酵母進行破壁，生 產富硒酵母培養(yǎng)物。酵母培養(yǎng)物(Yeast?culture)方法不同于常見的 活細胞酵母方法，要在菌體達到一定數量后進行破壁，酵母培養(yǎng)物不 含許多活酵母菌，而以酵母發(fā)酵的代謝產物、變性培養(yǎng)基、酵母細胞 壁和酵母內容物為主。目前還沒有采用液體-固體兩相發(fā)酵方法，將 酵母培養(yǎng)物與硒轉化結合在一起的現有技術。

發(fā)明內容：本發(fā)明要解決的技術問題是提供一種能夠實現充分富 硒的通過液體與固體兩相發(fā)酵生產富硒酵母培養(yǎng)物的方法。

在一個實施方案中，所述生產酵母培養(yǎng)物的方法包括：

(1)菌種篩選：通過酵母在無機硒或有機硒培養(yǎng)基中的生長表現 確定所用菌株；

(2)利用(1)中確定的菌株進行菌種逐級擴大培養(yǎng)；

(3)在含有無機硒或有機硒的液體培養(yǎng)基中用酵母菌進行液體發(fā) 酵轉化；

(4)液體發(fā)酵后，將液體發(fā)酵液與固體培養(yǎng)基混合，進行固體發(fā) 酵，所述固體發(fā)酵包括：先進行固體有氧發(fā)酵，再進行固體厭氧發(fā)酵 并對酵母進行破壁；

(5)對固體發(fā)酵產物進行干燥得到成品。

在一個實施方案中，本發(fā)明所述酵母為熱帶假絲酵母或釀酒酵 母。

在一個實施方案中，本發(fā)明所述無機硒為正四價無機硒或正六價 無機硒，優(yōu)選為亞硒酸鈉。

在一個實施方案中，本發(fā)明所述有機硒為蛋白硒、氨基酸硒或多 糖硒。

本發(fā)明方法中的菌種篩選步驟中，可通過酵母在高濃度正四價或 正六價無機硒培養(yǎng)基中的生長表現確定所用菌株，所述濃度優(yōu)選為 0.1％～0.5％重量。

本發(fā)明的菌種擴大培養(yǎng)可以是逐級擴大培養(yǎng)，可包括斜面培養(yǎng)、 搖瓶擴大培養(yǎng)和種子罐擴大培養(yǎng)，優(yōu)選包括平皿培養(yǎng)和斜面、搖瓶培 養(yǎng)。

在本發(fā)明的液體發(fā)酵轉化步驟中，液體培養(yǎng)基中無機硒或有機硒 含量可以為0.05％～0.4％重量，優(yōu)選0.1％～0.2％重量。

在本發(fā)明的液體發(fā)酵轉化步驟中，液體發(fā)酵轉化時間可以為12～ 48小時，優(yōu)選18～48小時。

在本發(fā)明的固體發(fā)酵步驟中，可以將液體發(fā)酵液與固體培養(yǎng)基按 1∶3～1.5∶1重量，優(yōu)選1∶2重量的比例混合。

本發(fā)明所述固體培養(yǎng)基可以含有豆粕(餅)、棉粕(餅)、菜粕 (餅)、花生粕(餅)、胡麻粕(餅)、甜菜粕(餅)、麥麩、稻糠、 次粉、木薯粉、大豆皮、玉米酒精糟、玉米或大米，或者其中一種或 多種的混合物；優(yōu)選含有豆粕(餅)、棉粕(餅)、菜粕(餅)、玉 米或麥麩，或者其中一種或多種的混合物。

本發(fā)明方法中所用的固體培養(yǎng)基可以直接使用或經過滅菌處理 后使用。

本發(fā)明的固體發(fā)酵可以利用堆放、容器、袋或固體發(fā)酵反應器進 行。

在本發(fā)明方法的一個實施方案中，所述固體有氧發(fā)酵進行16-36 小時，優(yōu)選24-36小時。

在本發(fā)明方法的一個實施方案中，所述固體厭氧發(fā)酵并對酵母進 行破壁的過程在40～60℃，優(yōu)選在50℃下進行。該過程可進行6～ 24小時，優(yōu)選12小時。