[發明專利]一種光度法對食品中色氨酸含量的測定方法

無效

• 申請號: 201010121100.1
• 申請日: 2010-03-10
• 公開（公告）號: CN101852737A
• 公開（公告）日: 2010-10-06
• 發明（設計）人: 宋薇
• 申請（專利權）人: 譜尼測試科技(北京)有限公司
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78;G01N21/31;G01N1/28
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種光度法對食品中色氨酸含量的測定方法。

背景技術

色氨酸是人體必需氨基酸，在人體內不能自己合成，而且這些氨基酸都非常重要，必須通過食物來攝取。色氨酸可以促進胃液及胰液的產生，從而人體對食物的消化吸收。色氨酸可轉化生成人體大腦中的一種重要神經傳遞物質——5-羥色胺，而5-羥色胺有中和腎上腺素與去甲腎上腺素的作用，并可改善睡眠的持續時間。當動物大腦中的5-羥色胺含量降低時，表現出異常的行為，出現神經錯亂的幻覺以及失眠等。此外，5-羥色胺有很強的血管收縮作用，可存在于許多組織，包括血小板和腸粘膜細胞中，受傷后的機體會通過釋放5-羥色胺來止血。醫藥上常將色氨酸用作抗悶劑、抗痙攣劑、胃分泌調節劑、胃粘膜保護劑和強抗昏迷劑等。

發明內容

本發明所要解決的技術問題在于，選用合適的試劑使樣品中的蛋白質水解，得到游離的色氨酸，而常規的酸水解方法會破壞蛋白質中的色氨酸。本發明采取以下設計方案：

本發明涉及的一種光度法對食品中色氨酸含量的測定方法，包括如下步驟：

稱取0.2-0.5g試樣或脫脂后試樣(精確至0.1mg)于50mL容量瓶中，在輕輕振搖中緩慢加入25ml?10％(m/V)氫氧化鉀溶液，使試樣濕潤且不粘壁，置于40±1℃培養箱中水解16～18h。取出水解液冷卻至室溫后，用水定容，播勻，取部分水解液以4000r/min轉速離心15min，取2mL上清液置10ml具塞試管中，并將試管放入冷水盆中，加入5mL?1％對二甲氨基苯甲醛硫酸溶液(1.0g對二甲氨基苯甲醛溶于10mol/L硫酸中并定容100mL)，搖勻。每個試樣另取2mL上清液于10ml具塞試管中，加5ml?10mol/L硫酸溶液作為樣品空白，搖勻，室溫放置30min。然后向每支試管內加入0.2mL?0.2％(m/V)亞硝酸鈉溶液，搖勻，室溫放置25min。以樣品空白調零，在590nm波長處1cm光徑測定樣品溶液的吸光度值，再從標準曲線上查的樣品溶液中色氨酸的含量。

本發明的優點是：采用本發明的方法食品中的色氨酸含量，快速有效，RSD小于10％，光度法的檢出限為1.91μg/mL。由此可見，本發明的方法，為檢測食品中的色氨酸含量，提供了一種可靠的便于實施的方法，能夠滿足研究和生產中的需要。

具體實施方式

實施例：食品中色氨酸含量的精密度和回收率檢測

稱取0.2g試樣或脫脂后試樣(精確至0.1mg)于50mL容量瓶中，在輕輕振搖中緩慢加入25ml?10％(m/V)氫氧化鉀溶液，使試樣濕潤且不粘壁，置于40±1℃培養箱中水解16～18h。取出水解液冷卻至室溫后，用水定容，播勻，取部分水解液以4000r/min轉速離心15min，取2mL上清液置10ml具塞試管中，并將試管放入冷水盆中，加入5mL?1％對二甲氨基苯甲醛硫酸溶液(1.0g對二甲氨基苯甲醛溶于10mol/L硫酸中并定容100mL)，搖勻。每個試樣另取2mL上清液于10ml具塞試管中，加5ml?10mol/L硫酸溶液作為樣品空白，搖勻，室溫放置30min。然后向每支試管內加入0.2mL?0.2％(m/V)亞硝酸鈉溶液，搖勻，室溫放置25min。以樣品空白調零，在590nm波長處1cm光徑測定樣品溶液的吸光度值，再從標準曲線上查的樣品溶液中色氨酸的含量。

色氨酸標準曲線的制作：配制7個不同濃度的標準溶液，色氨酸量分別為0、20、30、40、50、60、70μg，并測定此7個濃度標準溶液的吸光度。以質量(X，μg)為橫坐標、吸光度(Y)為縱坐標作圖可得一直線，經最小二乘法計算，得到線性回歸方程為y＝0.0091x-0.0066，相關系數的平方為R2＝0.9995。在0～70μg的線性范圍內色氨酸量與吸光度具有良好的相關性。

色氨酸標準液：