[發明專利]異戊酰螺旋霉素III的分離制備及其應用

有效

• 申請號: 201010119761.0
• 申請日: 2010-03-09
• 公開（公告）號: CN101773510A
• 公開（公告）日: 2010-07-14
• 發明（設計）人: 姜洋;梁鑫淼;金郁;郝玉有;徐霈名;張海平
• 申請（專利權）人: 沈陽同聯集團有限公司
• 主分類號: A61K31/7048
• 分類號: A61K31/7048;C07H17/08;C07H1/06;A61P31/00;A61P31/04
• 代理公司: 北京華科聯合專利事務所 11130
• 代理人: 楊厚;王為

1.異戊酰螺旋霉素III的分離方法，其特征是，步驟如下：

1)、粗分離：首先從可利霉素樣品中對異戊酰螺旋霉素III組分進行粗分離， 采用硅膠柱層析方法，以乙酸乙酯和甲醇作為洗脫劑，分別采用三倍柱體積乙酸 乙酯∶甲醇＝3∶1和三至五倍柱體積乙酸乙酯∶甲醇＝1∶1進行洗脫，收集乙酸 乙酯∶甲醇＝1∶1部分，將收集液濃縮至干，獲得異戊酰螺旋霉素I、II、III組 分，用于進一步純化分離；

2)、高效純化：采用制備型高效液相色譜對粗分離樣品進行純化，以ODS 作為色譜填料，用乙腈和醋酸氨緩沖液進行梯度洗脫，通過紫外檢測，記錄分離 的紫外譜圖，并對異戊酰螺旋霉素III目標峰進行收集；

具體色譜條件如下：儀器：工業級制備色譜，主要部件包括二元梯度泵，紫 外檢測器和色譜工作站；色譜柱：ODS制備色譜柱，型號為70i.d.×380mm，10μ； 流動相A：乙腈25％，流動相B：100mM?NH₄Ac水溶液75％，流速：260mL/min； 進樣量：10mL；進樣濃度：0.5g/mL；檢測波長：231nm；

收集方式：紫外觸發收集；按照異戊酰螺旋霉素III的保留時間，RT?48.009，收 集樣品，異戊酰螺旋霉素III高壓液相色譜圖見圖1；

3)、樣品后處理：收集的異戊酰螺旋霉素III樣品，采用旋轉蒸發除去乙腈， 然后用1倍量乙酸乙酯萃取，用旋轉蒸發除去萃取液中乙酸乙酯，得膏狀樣品， 用石油醚重溶所得樣品，再用旋轉蒸發除去石油醚，獲得異戊酰螺旋霉素III白 色粉末狀固體。