[發明專利]一種痰液的檢測、分析方法及其用途

無效

• 申請號: 201010118942.1
• 申請日: 2010-03-05
• 公開（公告）號: CN102192976A
• 公開（公告）日: 2011-09-21
• 發明（設計）人: 董競成;曹玉雪;崔焱;杜懿杰
• 申請（專利權）人: 復旦大學附屬華山醫院
• 主分類號: G01N33/50
• 分類號: G01N33/50;A61B10/02
• 代理公司: 上海正旦專利代理有限公司 31200
• 代理人: 吳桂琴

1.一種痰液的檢測、分析方法，其特征在于，采用誘導痰技術獲得哮喘患者咳出的深部痰液，對痰液進行細胞學分類計數以及檢測痰上清液和血清中相關炎癥指標，提供用于支氣管哮喘中醫“寒痰、熱痰”微觀辨證的參考指標，并評價其可靠性。

2.按權利要求1所述的痰液的檢測、分析方法，其特征在于，其包括下述步驟：

1)誘導痰技術：

①測基礎第一秒用力呼氣量FEV₁；②吸入沙丁胺醇；③10min后再測FEV₁作為基礎值；④室溫下超聲霧化器吸入消毒的高滲鹽水；⑤間隔測FEV₁和連續監測脈搏血氧飽和度；⑥測得FEV₁降低值大于20％基礎值時，暫停霧化吸入試驗；⑦收集霧化吸入后第5、10、15、20min咳出深部的痰液；

2)細胞學檢測：鏡下挑選上述痰液黏稠部分，稱重后加入0.1％二硫蘇糖醇(DTT)，置37℃水浴箱，螺旋振蕩至均勻，離心，制作細胞涂片，染色，光鏡下計數400個以上非立方上皮細胞，分類計數，留取上清液，-70℃冰箱凍存；

3)根據哮喘發作期的中醫辨證分類證型，收集符合寒痰證、熱痰證的哮喘患者痰涂片染色，顯微鏡下細胞分類計數，檢測痰液和血液嗜酸性粒細胞、中性粒細胞百分比；血常規測定嗜酸性粒細胞和中性粒細胞百分比；檢測痰上清液和血清中相關炎癥指標；

4)分析比較痰液中炎性細胞、相關細胞因子與血液中的相關炎癥指標，獲得用于支氣管哮喘中醫“寒痰、熱痰”微觀辨證的參考指標。

3.按權利要求1或2所述的痰液的檢測、分析方法，其特征在于，所述的痰上清液和血清中相關炎癥指標為血清白介素-8、IL-5、嗜酸性陽離子蛋白、IL-4、IL-6、IL-10、干擾素-γ、白三烯B4和C反應蛋白。

4.權利要求1或2所述的方法在制定評價支氣管哮喘中醫“寒痰、熱痰證”微觀辨證指標中的用途。

5.按權利要求4的用途，其特征在于，所述的指標是是嗜酸性粒細胞、嗜酸性陽離子蛋白、中性粒細胞、誘導痰EOS和嗜酸性陽離子蛋白、白三烯B4、TH2和/或C反應蛋白。

6.按權利要求4的用途，其特征在于，所述的哮喘寒痰證中嗜酸性粒細胞和嗜酸性陽離子蛋白升高。

7.按權利要求4的用途，其特征在于，所述的熱痰證中中性粒細胞升高。