[發明專利]一種可注射用凝膠微粒的制備方法

無效

• 申請號: 201010117490.5
• 申請日: 2010-03-04
• 公開（公告）號: CN102188712A
• 公開（公告）日: 2011-09-21
• 發明（設計）人: 朱彬;蔣麗霞;王文斌
• 申請（專利權）人: 上海其勝生物制劑有限公司
• 主分類號: A61K47/36
• 分類號: A61K47/36;A61K9/00;C08J3/24;C08L5/08;C08K5/1515;C08K5/41
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技術領域

本發明涉及到一種可注射用凝膠微粒的制備方法。

背景技術

經過交聯修飾后的透明質酸凝膠，克服了未交聯透明質酸凝膠降解速度快的缺點，并具有粘彈性能好，不溶于水，機械強度高，降解時間長的優點。使得其應用范圍和性能大大提高，能更好得滿足臨床使用的需要。

交聯透明質酸凝膠一般是由透明質酸溶液中加入交聯劑，在特定條件下，交聯劑與透明質酸分子發生化學鍵合而成的。因為交聯劑的化學鍵入，使原來的透明質酸長鏈結構改變，形成空間網狀結構。該結構使凝膠的機械強度和粘彈性提高，進而滿足皮下注射長降解時間的需要。但是由于絕大部分的交聯劑都具有細胞毒性，而交聯后的空間網狀結構更是對流離的交聯劑具有包裹作用，怎樣有效，快速，方便的去除凝膠中的交聯劑在目前的專利和研究中鮮有提及。而且經過交聯后的凝膠具有相當高的強度，如何將凝膠制備成方便使用的凝膠微粒，并能夠有效控制其凝膠微粒粒徑是目前需要解決的問題。

發明內容

本發明的目的在于提供一種合成交聯透明質酸凝膠，且能有效迅速去除交聯透明質酸凝膠中游離交聯劑，并將大塊凝膠制備成粒徑可控的可注射用凝膠微粒的方法。

為實現上述目的，本發明的提供一種可注射用凝膠微粒的制備方法，來解決以上問題。

本發明的步驟包括：

1.采用堿性溶液溶解透明質酸干粉，以30-150轉的速度充分攪拌2-10分鐘，配置成濃度為5-15％(W/W)的透明質酸堿性溶液，并放置2-4天，讓其充分溶解；

所說的堿性溶液為為NaOH水溶液，KOH水溶液，Na₂CO₃水溶液的一種或幾種的混合溶液，其濃度為0.1-5.0M；

所說的透明質酸干粉分子量為50-300萬道爾頓；

2.在步驟1的透明質酸堿性溶液中，加入交聯劑，然后在30-50攝氏度下3-5小時，形成堿性交聯透明質酸凝膠；

交聯劑為具有2個或以上官能團的化合物，其官能團能與透明質酸分子中的羥基、羧基或乙酰氨基中的一種或幾種反應，形成化學鍵；優選環氧類化合物、醛類、縮水多醇醚類以及二乙烯類化合物；加入量為交聯劑與透明質酸干粉比例4∶1到1∶20。

3.將步驟2的產物放入密封的容器中，在容器中通入流動的PBS緩沖液，透析4-6天，形成pH值為6.8-7.3的交聯透明質酸凝膠；

密封容器采用密閉的圓柱體、長方體或其他形狀的密閉容器，該容器上下端各有一開口，開口處有濾網或濾膜，能防止凝膠隨水流出。采用蠕動泵或齒輪泵作為動力，緩沖液流速為10-100ml/min；優選圓柱形密閉容器，采用蠕動泵作為動力。

4.將交聯透明質酸凝膠置于旋轉粉碎機中，加入一定量的分散溶液，旋轉粉碎1-5分鐘，再將粉碎后的液體進行離心分離，除去分散溶液，得到可注射用凝膠微粒。

采用的分散溶液為水或者PBS緩沖液，優選PBS緩沖液，比例1∶1；采用的旋轉粉碎轉速為5,000-15,000轉/分鐘，優選8,000-10,000轉；離心速度為3,000-12,000轉/分鐘，時間5-60分鐘，優選8,000-10,000轉，離心時間15分鐘。

本發明中透明質酸干粉可選用細菌發酵法生產而成，并經過除蛋白除鹽的提純處理。該發明的的交聯反應原理是使用多官能團化學交聯劑，利用交聯存在的2個或2個以上的官能團與透明質酸上的活性官能團(羥基、羧基和乙酰氨基)發生發應，使透明質酸分子之間和分子鏈內部產生交聯化學鍵。使分子鏈延長，并形成空間網狀結構，從而達到機械強度增強，降解能力減弱的效果。由于修飾的交聯鍵較少(不到1％)，所以仍然具有天然透明質酸的生物相容性和生物活性。

區別于以前常規采用的靜態透析法，本發明采用的流動PBS緩沖液透析法具有透析時間短，更換透析液方便的優點。并且采用封閉容器可以將外界環境對制品的影響降到最低，能有效避免空氣中的浮塵和浮菌對制品的污染。

本發明采用旋轉粉碎的后處理方法，相對于以往的擠壓法，該方法在操作簡單，費時短，并可以通過控制轉速和時間，調節凝膠微粒的大小。而且切碎法分割出的微粒粒形接近于球形，相對于擠壓法得到的長條形微粒來說，同體積的微粒因其表面積小而具有更好的抗降解能力。其粒形圖，請看說明書附圖圖1。

具體實施方式

以下結合附圖和實施例對本發明作進一步說明。

實施例1