[發明專利]一種左亞葉酸鈉原料藥的檢測方法

無效

• 申請號: 201010117294.8
• 申請日: 2010-03-04
• 公開（公告）號: CN102192956A
• 公開（公告）日: 2011-09-21
• 發明（設計）人: 靳朝東;鄒美香;單淇;孫歆慧;周福軍;吳疆;薛津;李祎亮;侯文彬
• 申請（專利權）人: 天津康鴻醫藥科技發展有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/50;G01N30/74
• 代理公司: 北京泛華偉業知識產權代理有限公司 11280
• 代理人: 郭廣迅

1.一種左亞葉酸鈉原料藥的檢測方法，該檢測方法包括采用反相高效液相色譜法檢測左亞葉酸鈉原料藥中左亞葉酸根和雜質的含量，其中反相高效液相色譜的條件包括：

采用以十八烷基或辛烷基鍵合硅膠為填充劑的色譜柱；

采用包含緩沖劑和四丁基氫氧化銨的pH值為7.0～7.8的、體積比為70∶30～95∶5的水與有機相的混合流動相，其中有機相為甲醇、乙腈、乙醇、異丙醇或正丙醇。

2.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述緩沖劑選自磷酸鹽，例如，磷酸氫二銨、磷酸氫二鉀、磷酸二氫銨、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鈉和磷酸二氫鈉，檸檬酸或其鹽，酒石酸或其鹽，硫酸鹽以及高氯酸鹽中的一種或多種；優選為磷酸鹽，例如，磷酸氫二銨、磷酸氫二鉀、磷酸二氫銨、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鈉和磷酸二氫鈉中的一種或多種；更優選為磷酸氫二鈉。

3.根據權利要求1或2所述的檢測方法，其特征在于，所述混合流動相中緩沖劑的濃度為0.05～1.5％(重量/體積)，四丁基氫氧化銨的濃度為0.01～0.5％(重量/體積)。

4.根據權利要求1至3中任一項所述的檢測方法，其特征在于，所述混合流動相為體積比為70∶30～95∶5的水與甲醇的混合流動相，優選為體積比為75∶25的水與甲醇的混合流動相；或者體積比為70∶30～95∶5的水與乙腈的混合流動相，優選為體積比為80∶20的水與乙腈的混合流動相。

5.根據權利要求1至4中任一項所述的檢測方法，其特征在于，所述混合流動相為包含0.28％(重量/體積)磷酸氫二鈉和0.1％(體積/體積)四丁基氫氧化銨的體積比為75∶25、pH值為7.4的水與甲醇的混合流動相。

6.根據權利要求1至5中任一項所述的檢測方法，其特征在于，所述混合流動相的pH值采用磷酸調節。

7.根據權利要求1至6中任一項所述的檢測方法，其特征在于，所述反相高效液相色譜條件還包括柱溫為25～40℃，優選為30℃；檢測器為紫外檢測器，檢測波長為286nm。

8.根據權利要求1至7中任一項所述的檢測方法，其特征在于，所述檢測方法還包括采用已知含量左亞葉酸鈉作為對照品，以外標法計算左亞葉酸鈉原料藥中左亞葉酸根；和/或以自身對照法計算雜質的含量。

9.根據權利要求1至8中任一項所述的檢測方法，其特征在于，所述檢測方法還包括采用高效液相色譜法檢測左亞葉酸鈉原料藥中左亞葉酸鈉右旋異構體的含量，其中高效液相色譜條件包括：

采用Pirkle型、纖維素型、環糊精型、蛋白質型或大環糖肽抗生素鍵合固定相為填充劑的色譜柱；

采用包含緩沖劑的pH值為5.0～7.0的、體積比為70∶30～97∶3的水與有機相的混合流動相，其中有機相為甲醇、乙腈、乙醇、異丙醇或正丙醇。

10.根據權利要求9所述的檢測方法，其特征在于，所述緩沖劑選自磷酸鹽，例如，磷酸氫二銨、磷酸氫二鉀、磷酸二氫銨、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鈉和磷酸二氫鈉，檸檬酸或其鹽，酒石酸或其鹽，硫酸鹽以及高氯酸鹽中的一種或多種；優選為磷酸鹽，例如，磷酸氫二銨、磷酸氫二鉀、磷酸二氫銨、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鈉和磷酸二氫鈉中的一種或多種；更優選為磷酸氫二鈉。

11.根據權利要求9或10所述的檢測方法，其特征在于，所述混合流動相中緩沖劑的濃度為0.01～1.0mol/L。

12.根據權利要求9至11中任一項所述的檢測方法，其特征在于，所述混合流動相為體積比為70∶30～97∶3的水與異丙醇的混合流動相，優選為體積比為90∶10的水與異丙醇的混合流動相。

13.根據權利要求9至12中任一項所述的檢測方法，其特征在于，所述混合流動相為包含0.05mol/L磷酸氫二鈉的體積比為90∶10、pH值為5.5的水與異丙醇的混合流動相。

14.根據權利要求9至13中任一項所述的檢測方法，其特征在于，所述混合流動相的pH值采用磷酸調節。

15.根據權利要求9至14中任一項所述的檢測方法，其特征在于，所述反相高效液相色譜條件還包括柱溫為25～40℃，優選為30℃；檢測器為紫外檢測器，檢測波長為286nm。