[發(fā)明專利]一種發(fā)酵生產(chǎn)阿魏菇多糖及其口服液的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201010115794.8
• 申請日: 2010-01-31
• 公開（公告）號: CN101812491A
• 公開（公告）日: 2010-08-25
• 發(fā)明（設計）人: 陳恒雷;林增祥;呂長武;陳小龍
• 申請（專利權）人: 陳恒雷;林增祥;呂長武
• 主分類號: C12P19/04
• 分類號: C12P19/04;C08B37/00;A61K31/715;A61K9/08;A61P37/04;A61P39/06;A61P35/00;A23L1/29;A23L1/28;C12R1/645
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1.一種基于阿魏菇生物學特性的發(fā)酵生產(chǎn)阿魏菇多糖罐批發(fā)酵方法，其特征在 于：母種的斜面培養(yǎng)：用無菌接種鉤刮取少量阿魏菇菌絲體，接種到PDA斜 面培養(yǎng)基上，在28℃培養(yǎng)7d；原種的種瓶培養(yǎng)：用無菌接種鉤挑取一定量的 斜面菌絲塊，接種到裝有350mL種瓶培養(yǎng)基的500mL廣口瓶中，28℃恒溫 靜置培養(yǎng)15d，其中，種瓶培養(yǎng)基的質(zhì)量體積比為：木屑粉30％、麩皮粉7 ％、白砂糖0.5％、石膏0.5％、石灰2％，其余為無菌水；種液的150L-1500L 種子罐擴大培養(yǎng)：菌絲體長滿種瓶后，用無菌接種鏟將菌絲塊攪碎并瓶于裝 有1500mL無菌水的2000mL三角瓶中，然后加入0.2％的土霉素抑止雜菌污 染，按1∶20的接種量接種于裝有100L種液培養(yǎng)基一的150L氣升式發(fā)酵罐中， 通氣充分攪拌培養(yǎng)，28℃發(fā)酵96小時，接著按10％的接種量接入裝有1000L 種液培養(yǎng)基二的1500L攪拌釜式發(fā)酵罐中擴培，25℃恒溫培養(yǎng)96h，其中， 150L、1500L攪拌釜式發(fā)酵罐的攪拌轉(zhuǎn)速分別為200r/min和160r/min、空氣 流量分別為12m³/h和120m³/h，種液培養(yǎng)基一的質(zhì)量體積比為：小麥粉1.5％、 蔗糖1.0％、酵母膏0.4％、麩皮需煮汁1.5％、KH₂PO₄0.2％、MgSO₄0.15％， 種液培養(yǎng)基二的質(zhì)量體積比為：小麥粉0.7％、蔗糖0.7％、酵母膏0.28％、 麩皮需煮汁1.0％、KH₂PO₄0.2％、MgSO₄0.15％，pH值滅菌前均自然，121℃ 滅菌30min；10m³發(fā)酵罐發(fā)酵培養(yǎng)：將經(jīng)過擴培的發(fā)酵液按1∶10的比例接種 于裝有7m³發(fā)酵培養(yǎng)基的10m³攪拌釜式發(fā)酵罐中，28℃恒溫發(fā)酵120h后結 束發(fā)酵；其中，攪拌轉(zhuǎn)速為120r/min、空氣流量為840m³/h，發(fā)酵培養(yǎng)基的質(zhì) 量體積比為：小麥粉0.5％、蔗糖0.5％、酵母膏0.2％、麩皮需煮汁0.7％、 KH₂PO₄0.2％、MgSO₄0.15％，pH值滅菌前自然，121℃滅菌30min。

2.一種基于阿魏菇多糖理化特性和阿魏菇菌體細胞結構組成特點的發(fā)酵生產(chǎn)阿 魏菇多糖后提取方法，其特征在于：發(fā)酵產(chǎn)物的預處理：將權利要求1中所 述方法經(jīng)過罐批發(fā)酵獲得的發(fā)酵產(chǎn)物50L裝入200目的過濾袋中置于SS800 三足式離心機中，在1200r/min的轉(zhuǎn)速下離心30min，再按料液比1∶1.5加入 無水乙醇，在上述相同工作轉(zhuǎn)速下離心30min，收集干菌體，然后將得到的干 菌體50kg平均裝入4個25L球磨罐中置于QM-2SP100-GL球磨機中，在 700r/min的轉(zhuǎn)速下破壁30min，收集破碎菌體；阿魏菇多糖的連續(xù)提取及濃縮： 將經(jīng)過預處理的發(fā)酵產(chǎn)物130kg按料液比1∶5加入650L經(jīng)過去離子處理的自 來水平均打入700L1、2號提取罐中，經(jīng)過功率6KW的超聲波處理5min后， 在100℃的提取溫度、50r/min的轉(zhuǎn)速下攪拌提取60min，然后將1號罐中的 提取液放入暫存罐中，關閉閥門再將2號提取罐的提取液打入1號提取罐中， 暫存罐中的提取液打入2號提取罐中，在上述相同的提取條件下攪拌提取 60min，接著將提取液放入暫存罐中，開啟減壓閥門在0.08MPa的負壓下提取 液被倒吸入2.5m²刮膜式旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中在95℃、200r/min減壓濃縮，蒸發(fā)的 水蒸氣經(jīng)過10m²冷凝器在0℃液化回收到1.5m³溶劑回收罐中，得到的濃縮 物打入醇析罐中結晶；低溫醇析：將得到的濃縮物按料液比1∶5打入裝有150L 無水乙醇的200L醇析罐中在-4℃結晶12h，然后放入12-15個孔徑38μm的尼 龍袋中掛于300L存儲罐中過濾24h，將得到的結晶物倒入30L不銹鋼桶中以 備后續(xù)脫溶；兩步脫溶：稱量30kg結晶物倒入脫溶鍋中，在60℃的脫溶溫度、 0.08MPa工作壓力下減壓脫溶2h；然后從脫溶鍋底部通入N₂，在上述相同的 條件下減壓脫溶1.5h，最后，收集阿魏菇菌絲體粗多糖，以備阿魏菇多糖口 服液深加工產(chǎn)品添加之用。