[發明專利]一種香蕉穿孔線蟲早期分子檢測方法無效
| 申請號： | 201010113930.X | 申請日： | 2010-02-25 |
| 公開（公告）號： | CN101792755A | 公開（公告）日： | 2010-08-04 |
| 發明（設計）人： | 彭德良;王瓊;耿麗鳳;李佳;彭煥;張東升 | 申請（專利權）人： | 中國農業科學院植物保護研究所 |
| 主分類號： | C12N15/10 | 分類號： | C12N15/10;C12Q1/68;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 北京海虹嘉誠知識產權代理有限公司 11129 | 代理人： | 胡敬紅 |
| 地址： | 100193 *** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 香蕉 穿孔 線蟲 早期 分子 檢測 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種香蕉穿孔線蟲早期分子檢測方法，其特征在于以香蕉穿孔線蟲DNA為模板，采用以下特異性引物進行PCR擴增：
上游引物：RsF1?5’-TGTCATCGCCTTTGGCAGCT-3’
下游引物：RsR1?5’-TGGTAAACGACCCTGAACCAG-3’。
2.根據權利要求1所述的早期分子檢測方法，所述PCR擴增的體系為：5μl?10×含Mg2+的PCR緩沖液，4μl?10mM?dNTPS，1μl?0.1％BSA，1.5μl?20uM引物對RsF1/RsR1，0.5μl?5U/ul的Taq?DNA聚合酶，1μl香蕉穿孔線蟲DNA，滅菌ddH2O補足至25μl。
3.根據權利要求1所述的早期分子檢測方法，所述PCR擴增的程序為：95℃4分鐘，95℃變性45秒，56℃退火30秒，72℃延伸1分鐘，40個循環；72℃再延伸10分鐘，4℃保存。
4.根據權利要求1所述的早期分子檢測方法，所述PCR擴增的體系中還包括如下序列的通用引物：
5’-ACAAGTACCGTGAGGGAAAGTTG-3’，
5’-TCGGAAGGAACCAGCTACTA-3’。
5.權利要求1～4所述任一早期分子檢測方法在診斷植物、土壤的香蕉穿孔線蟲感染情況或鑒別香蕉穿孔線蟲中的應用。?
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