[發(fā)明專利]一種乙酸耐性乙醇生產(chǎn)釀酒酵母菌株及菌株篩選方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201010111324.4
• 申請(qǐng)日: 2010-02-10
• 公開（公告）號(hào): CN102146345A
• 公開（公告）日: 2011-08-10
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王士安;袁博;李福利
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)科學(xué)院青島生物能源與過(guò)程研究所
• 主分類號(hào): C12N1/18
• 分類號(hào): C12N1/18;C12N15/01;C12P7/10;C12R1/865
• 代理公司: 中科專利商標(biāo)代理有限責(zé)任公司 11021
• 代理人: 周長(zhǎng)興

1.一種乙酸耐性乙醇生產(chǎn)釀酒酵母菌株，該菌株分類學(xué)命名為釀酒酵母(Saccharomyces?cerevisiae)E5.9，保藏號(hào)為：CGMCC?No.3618。

2.權(quán)利要求1所述乙酸耐性乙醇生產(chǎn)釀酒酵母菌株的篩選方法，為液體全篩選法，主要步驟如下：

1)菌株誘變：對(duì)釀酒酵母出發(fā)菌株進(jìn)行物理、化學(xué)或生物誘變；

2)液體全篩選：將所有誘變菌株平均轉(zhuǎn)接于24孔板中，首先無(wú)選擇壓力預(yù)培養(yǎng)，然后添加選擇壓力繼續(xù)培養(yǎng)至多個(gè)孔出現(xiàn)正突變體；

3)固體平板篩選：稀釋正突變培養(yǎng)物，涂布固體選擇培養(yǎng)基，挑選優(yōu)勢(shì)抗性克隆；

4)傳代馴化：將優(yōu)勢(shì)抗性克隆在選擇性液體培養(yǎng)基中傳代馴化，篩選遺傳穩(wěn)定的抗逆菌株。

3.如權(quán)利要求2所述的篩選方法，其中，所述菌株誘變是采用紫外誘變、甲基磺酸乙酯(EMS)誘變或微波誘變。

4.如權(quán)利要求2或3所述的篩選方法，其中，所述菌株誘變的誘變細(xì)胞數(shù)為2×10⁶-5×10⁸個(gè)。

5.如權(quán)利要求2所述的篩選方法，其中，所述24孔板為1-100個(gè)，每孔的選擇培養(yǎng)基量為0.5-2.5ml。

6.如權(quán)利要求1所述的篩選方法，其中，所述傳代馴化接種量由大到小，第一次馴化接種量為20-10％，逐次遞減至接種量小于1％。