[發明專利]一種克倫特羅檢測試劑盒及其使用方法

無效

• 申請號: 201010110564.2
• 申請日: 2010-02-12
• 公開（公告）號: CN101776684A
• 公開（公告）日: 2010-07-14
• 發明（設計）人: 肖理文;胡佳駿;郭曉梅;李康;董國秀;蔡曉帆
• 申請（專利權）人: 上海優你生物科技股份有限公司
• 主分類號: G01N33/535
• 分類號: G01N33/535;G01N33/543;G01N21/31
• 代理公司: 北京金信立方知識產權代理有限公司 11225
• 代理人: 徐琳;朱梅

1.一種克倫特羅檢測試劑盒，其包括：

(1)包被了克倫特羅抗體的微量測試孔；

(2)克倫特羅標準溶液；

(3)清洗緩沖液；

(4)濃縮酶標記物；

(5)底物溶液A；

(6)底物溶液B；

(7)反應終止液；和

(8)酶標稀釋液，

其中，將克倫特羅進行重氮化，再與牛血清白蛋白BSA進行偶氮連結，形成克倫特羅-BSA，作為制備多克隆抗體的免疫抗原，并且用該免疫抗原制備的多克隆抗體包被微量測試孔，以及

在酶標記物的制備中，將小分子克倫特羅先進行重氮化，再與辣根過氧化物酶HRP進行偶氮連接形成酶標抗原克倫特羅-HRP。

2.根據權利要求1所述的克倫特羅檢測試劑盒，其中，所述克倫特羅標準溶液濃度分別為0ng/mL、0.1ng/mL、0.3ng/mL、0.9ng/mL、2.7ng/mL、8.1ng/mL。

3.根據權利要求1所述的克倫特羅檢測試劑盒，其中，所述濃縮酶標記物的濃度為0.3μg/mL-1.0μg/mL。

4.根據權利要求1所述的克倫特羅檢測試劑盒，其中，所述包被了克倫特羅抗體的微量測試孔的制備過程中，克倫特羅抗體包被濃度為0.1-1μg/mL，包被體積為100μL。

5.根據權利要求1所述的克倫特羅檢測試劑盒，其中，所述清洗緩沖液為含有千分之五的吐溫20的0.05moL/L的PBS。

6.根據權利要求1所述的克倫特羅檢測試劑盒，其中，所述底物溶液A用一定濃度的檸檬酸緩沖液，調pH值至4.5-5.0，加入千分之一至千分之五的30％的H₂O₂制得，而所述底物溶液B為8mg/mL-16mg/mL的四甲基聯苯胺溶液，該溶液的溶劑為等體積混合的二甲亞砜和水。

7.根據權利要求1所述的克倫特羅檢測試劑盒，其中，所述反應終止液為10％-15％的硫酸溶液。

8.一種檢測樣品中殘留的克倫特羅的方法，該方法包括以下步驟：

(1)檢測樣品的制備；

(2)使用權利要求1～7中任一項所述的試劑盒檢測克倫特羅；和

(3)分析檢測結果。

9.根據權利要求8所述的方法，其中，向包被了克倫特羅抗體的微量測試孔中加入克倫特羅標準溶液或樣品溶液和酶標克倫特羅溶液，競爭反應后，用清洗緩沖液洗板后加入等體積混合的底物溶液A和B，顯色，然后加入反應終止液終止，用酶標儀測定吸光度值，其中，所述酶標克倫特羅溶液為用所述酶標稀釋液稀釋濃縮酶標記物得到的溶液。

10.根據權利要求8所述的方法，其中，所述樣品為尿液、血清、動物組織、器官或飼料。