[發明專利]防治番茄青枯病的真菌菌劑及其制備方法

無效

• 申請號: 201010107074.7
• 申請日: 2010-02-08
• 公開（公告）號: CN101914449A
• 公開（公告）日: 2010-12-15
• 發明（設計）人: 薛智勇;朱鳳香;王衛平;洪春來;陳曉旸;吳傳珍;楊友坤;奚輝
• 申請（專利權）人: 浙江省農業科學院
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;A01N63/04;A01P1/00;C12R1/885
• 代理公司: 杭州豐禾專利事務所有限公司 33214
• 代理人: 沈伾伾

1.一種Trichoderma?gamsii菌株6-18，其菌株保藏號為CGMCC?NO.3335。

2.一種防治番茄青枯病的真菌菌劑，其特征在于該菌劑以保藏編號為CGMCCNo.3335的Trichoderma?gamsii菌株6-18為菌種，馬丁氏固體培養基為斜面培養基，馬鈴薯蔗糖液體培養基為搖瓶菌種培養基和發酵罐培養基；經各級發酵、制備成液體真菌菌劑，或以滅菌麩皮或滅菌草炭為吸附劑進一步制備成固體真菌菌劑而獲得。

3.一種防治番茄青枯病真菌菌劑的制備方法，其特征在于該方法按以下步驟進行：

(1)各級培養基的配制與吸附載體的準備，其中：

a)斜面培養基：馬丁氏固體培養基，備用；

b)搖瓶菌種培養基：馬鈴薯蔗糖液體培養基，備用；

c)生產發酵罐培養基：同搖瓶菌種培養基，備用；

(2)斜面菌種培養：將CGMCC?No.3335菌株6-18接種于步驟(1)斜面培養基上，在28-32℃的培養箱中培養3-4天，取出后直接應用或放入冰箱中冷藏，保存；

(3)搖瓶菌種擴繁：在無菌操作下，取一鏟斜面菌種接入60ml步驟(1)馬鈴薯蔗糖液體培養基中，于28-32℃，120-220轉/分的搖床中，培養40-64小時，取出直接應用或放入冰箱中冷藏，保存；

(4)生產發酵罐培養：將步驟(1)生產發酵罐培養基放入發酵罐中，在該罐內溫度121℃，進行30分鐘蒸汽高溫滅菌后，在保持罐體壓力0.02-0.04MPa條件下，冷卻至28-32℃；在火焰保護下通過接種閥門將步驟(3)搖瓶菌種按3-10％的接種量迅速接入發酵罐內；在攪拌機轉速120-220轉/分，溫度28-32℃，通氣量4m³/h，罐壓保持0.02-0.04MPa，pH自然，培養40-64小時，至發酵液菌絲體鮮重為0.5g/ml以上，裝瓶，即為液體真菌菌劑；

(5)固體菌劑的制備：先將吸附載體麩皮或草炭進行高溫滅菌并冷卻至室溫；再將步驟(4)液體真菌菌劑與滅菌后吸附載體按重量1∶5比例拌勻，吸附，檢測其活菌量為0.2億cfu/g以上、含水率控制在30％以下，裝袋、封口，即為固體真菌菌劑。