[發明專利]一種標記細胞骨架蛋白的多肽及其真核表達載體

無效

• 申請號: 201010106085.3
• 申請日: 2010-01-19
• 公開（公告）號: CN101880321A
• 公開（公告）日: 2010-11-10
• 發明（設計）人: 張斌;王濤;藥立波
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍第四軍醫大學
• 主分類號: C07K14/47
• 分類號: C07K14/47;C07K1/13;C12N15/62;C12N15/79;G01N21/64
• 代理公司: 西安通大專利代理有限責任公司 61200
• 代理人: 陸萬壽

1.一種標記細胞骨架蛋白的多肽，其特征在于：該多肽為JN27，其氨基酸序列如SEQ.ID.NO.1所示。

2.如權利要求1所述的標記細胞骨架蛋白的多肽，其特征在于：所述的多肽是在JN27的C端增加3個氨基酸殘基得到的多肽JN30，其氨基酸序列如SEQ.ID.NO.2所示。

3.如權利要求1所述的標記細胞骨架蛋白的多肽，其特征在于：所述的多肽是在JN27的N端增加11個氨基酸殘基的穿膜肽得到的多肽TatJN27，其氨基酸序列如SEQ.ID.NO.3所示。

4.一種用于細胞骨架蛋白標記的真核表達載體，其特征在于：該載體包含標記基因EGFP和細胞骨架蛋白靶向基因的融合基因，所述的細胞骨架蛋白靶向基因為基因JN27或JN30；

基因JN27的核苷酸序列如SEQ.ID.NO.4所示，基因JN30的核苷酸序列如SEQ.ID.NO.5所示。

5.如權利要求4所述的用于細胞骨架蛋白標記的真核表達載體，其特征在于：所述的真核表達載體是pEGFP-C2-JN27，通過HindIII和BamHI酶切位點將基因JN27克隆到pEGFP-C2載體上。

6.如權利要求4所述的用于細胞骨架蛋白標記的真核表達載體，其特征在于：所述的真核表達載體是pEGFP-C2-JN30，通過HindIII和BamHI酶切位點將基因JN30克隆到pEGFP-C2載體上。

7.多肽JN27、JN30或TatJN27應用于細胞骨架蛋白的標記。

8.如權利要求7所述的應用，其特征在于：將多肽JN27或JN30用熒光物質標記后，再將熒光標記的JN27或JN30加入到抗體封閉液中，與經過固定、Triton處理的待標記細胞孵育2h，然后在熒光顯微鏡下顯示標記結果；

將多肽TatJN27用熒光物質標記后，再將熒光標記的TatJN27直接加入待標記細胞的培養液中，37℃孵育12h；然后在熒光顯微鏡下顯示標記結果。

9.真核表達載體pEGFP-C2-JN27或pEGFP-C2-JN30應用于細胞骨架蛋白的標記。

10.如權利要求9所述的應用，其特征在于：將真核表達載體pEGFP-C2-JN27或pEGFP-C2-JN30轉染到待標記的細胞中，使其得到表達后，然后在熒光顯微鏡下顯示標記結果。