[發明專利]一種基于酶聯免疫法的快速檢測系統

無效

• 申請號: 201010103698.1
• 申請日: 2010-02-01
• 公開（公告）號: CN101769923A
• 公開（公告）日: 2010-07-07
• 發明（設計）人: 陶正杰;夏晶
• 申請（專利權）人: 陶正杰;夏晶
• 主分類號: G01N33/544
• 分類號: G01N33/544;G01N33/535;G01N21/31
• 代理公司: 南京眾聯專利代理有限公司 32206
• 代理人: 郭俊玲

1.一種基于酶聯免疫法的快速檢測系統，其特征是包括置于一個檢測盒中的以下組件：a、檢測構件；b、用于放置目標樣品的空瓶；c、裝有經冷凍干燥后抗體的試劑瓶；d、裝有酶標標記物的試劑瓶；e、裝有用于定性的底物的試劑瓶；f、裝有用于定量的底物的試劑瓶；g、裝有緩沖溶液的試劑瓶。

2.根據權利要求1所述的一種基于酶聯免疫法的快速檢測系統，其特征是所述檢測構件為包被有抗體的固相載體，所述固相載體套有一個比色杯。

3.根據權利要求2所述的一種基于酶聯免疫法的快速檢測系統，其特征是所述固相載體的基質主體為聚羥基丁酸酯，所述基質里還嵌入有帶活性功能團的化合物。

4.根據權利要求3所述的一種基于酶聯免疫法的快速檢測系統，其特征是所述帶活性功能團的化合物為聚氨基酸，所述嵌入的聚氨基酸與聚羥基丁酸酯基質的質量比為(0.1-8)∶100。

5.根據權利要求4所述的一種基于酶聯免疫法的快速檢測系統，其特征是所述聚氨基酸為聚天門冬氨酸、聚賴氨酸或聚谷氨酸。

6.根據權利要求3、4或5所述的一種基于酶聯免疫法的快速檢測系統，其特征是所述以聚羥基丁酸酯為基質主體的固相載體形狀為棒狀，即檢測棒。

7.根據權利要求6所述的一種基于酶聯免疫法的快速檢測系統，其特征是所述檢測棒的制備方法為：將聚氨基酸與聚羥基丁酸酯按(0.1-8)∶100的質量比混合均勻后，送入壓塑機在110-210℃的加工溫度下進行壓塑并制成珠粒狀，然后再將珠粒狀壓塑物通過常規工藝制成棒狀，即得。

8.根據權利要求1或2所述的一種基于酶聯免疫法的快速檢測系統，其特征是所述抗體可為任何種類的免疫球蛋白IgG，所述抗體的包被方法為：首先將抗體以20μg/ml溶于磷酸鹽緩沖溶液，將固相載體浸入到抗體溶液中，放入冰箱冷藏過夜；然后取出固相載體，再將其浸入封閉液中，封閉液為溶有體積濃度1％的Tween20的磷酸鹽緩沖溶液，室溫下靜置兩小時后，取出自然晾干；固相載體套入比色杯中，2-8℃冷藏保存，所述固相載體為檢測棒。

9.根據權利要求1所述的一種基于酶聯免疫法的快速檢測系統，其特征是所述裝有經過冷凍干燥后的抗體的試劑瓶的制備方法為：將抗體以1mg/ml溶于磷酸鹽緩沖溶液，取20μl注入試劑瓶中，放入冷凍干燥器中過夜凍干，取出后2-8℃冷藏保存；

所述裝有酶標標記物試劑瓶的制備方法為：將1mg金黃色葡萄球菌蛋白A偶聯堿性磷酸酶保存于1ml的50×10^-3mol/L?Tris溶液中，然后再加入氯化鎂、氯化鋅、牛血清蛋白、甘油和疊氮化鈉，使氯化鎂達到1.0×10^-3mol/L、氯化鋅達到0.1×10^-3mol/L、牛血清白蛋白的體積濃度達到1％、甘油的體積濃度達到50％和疊氮化鈉達到15×10^-3mol/L，調pH值為8.0，即得工作濃度為1mg/ml的金黃色葡萄球菌蛋白A偶聯堿性磷酸酶；取0.4μl注入試劑瓶中，2-8℃冷藏保存；

所述用于定性測量的底物為5-溴-4-氯-3-吲哚基-磷酸鹽(BCIP)與氯化硝基四氮唑藍(NBT)的混合液，所述裝有底物試劑瓶的制備方法為：將摩爾濃度為4.8×10^-4mol/L的BCIP和摩爾濃度為5.1×10^-4mol/L?NBT混合，然后取1ml混合液注入試劑瓶中，2-8℃冷藏并避光保存；

所述用于定量測量的底物為溶于體積濃度為10％的二羥乙基胺的硝基苯磷酸鹽，所述硝基苯磷酸鹽的質量濃度為1.0mg/ml，所述溶液的pH值為9.5，然后取1ml混合液注入試劑瓶中，2-8℃冷藏并避光保存；

所述裝有緩沖溶液試劑瓶的制備方法：將牛血清白蛋白溶于磷酸鹽緩沖溶液中使牛血清白蛋白的體積濃度達到1％，然后取5ml注入試劑瓶中，2-8℃冷藏保存即得。