[發明專利]一種同時檢測人血液中的11個運動相關基因和4個內參基因的基因表達的方法

無效

• 申請號: 201010100753.1
• 申請日: 2010-01-26
• 公開（公告）號: CN101851674A
• 公開（公告）日: 2010-10-06
• 發明（設計）人: 田亞平;李立青
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍總醫院
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 北京君智知識產權代理事務所 11305
• 代理人: 鄭明

技術領域

本發明涉及同時檢測人血液中的11個運動相關基因和4個內參基因表達情況的方法，屬于醫學分子生物學領域。

背景技術

基因在不同個體不同細胞間及不同生長階段的選擇性表達決定了生命活動的多樣性，如發育與分化、衰老與死亡、內環境穩定、細胞周期調控等。比較個體間基因表達的差異能為我們揭示生命個體間某種能力的差異提供依據。我們研究運動員的運動相關基因表達情況，與非運動員對比分析，就能在一定程度上從分子水平揭示運動員之所以運動成績優秀的原因。人的睫狀神經營養因子(ciliary?neurotrophic?factor，CNTF，NM_000614)有良好的促運動神經元生長作用，對外傷后運動神經元胞體的變性、死亡顯示出明顯的預防作用，并可調節血糖和血脂代謝，改善胰島素水平(Sendtner?M，Schmalbruch?H，KA，et?al.Ciliary?neurotrophic?factor?prevents?degeneration?of?motor?neurons?inmouse?mutant?progressive?motor?neuronopathy.Nature.1992，358(6386)：502-504)。腎上腺素能β2受體(adrenergic，beta-2-receptor，ADRB2，NM_000024)基因通過調控ADRB2與兒茶酚胺的結合位點而發揮調節脂肪水解供能作用，而脂肪水解供能又是耐力運動的重要能量代謝途徑。(Wolarth?B，Rivera?MA，Oppert?JM，et?al.A?polymorphismin?the?alpha2a-adrenoceptor?gene?and?endurance?ethlete?atatus.Med?Sci?Sports?Exerc.2000，32(10)：1709-1712.)。瘦素受體(leptin?receptor，LEPR，NM_002303)通過與瘦素結合影響一系列機體代謝過程，如胰島素的釋放，葡萄糖的產生、轉運、代謝及脂肪的分解合成等(Cohen?SL，Halaas?JL，Friedman?JM，et?al.Human?leptincharacterization.Nature.1996，382(6592)：589.)。轉化生長因子-β1(transforminggrowth?factor，beta?1，TGFB1，NM_000660)生物學功能異常復雜，在多種組織細胞的增殖分化、間質形成、組織損傷修復、骨質再生、胚胎發生中起著關鍵性作用(李翠玲，崔正言.轉化生長因子β分子生物學研究進展.國外醫學，免疫學分冊.1995，(3)：124-127.)。線粒體解偶聯蛋白2(uncoupl?ing?protein?2，UCP2，NM_003355)的主要功能是參與線粒體ATP生成和活性氧的調控(Boss?0，Hagen?T，Lowell?BB.Uncouplingproteins?2?and?3：potential?regulators?of?mitochondrial?energymetabolism.Diabetes.2000，49(2)：143-156)。磷酸脂酶C-γ1(phospholipase?C，gamma1，PLCG1，NM_002660)是磷脂酰肌醇信號通路的關鍵酶，在機體內分布極為廣泛，在各種細胞中廣泛存在，許多細胞外因子，如細胞表面抗原、免疫球蛋白、細胞因子、生長因子等都可以借助該酶的生化途徑作用于細胞，調控細胞代謝(Rebecchi?MJ，PentyalaSN.Structure，function，and?control?of?phosphoinositide-specific?phospholipaseC.Physiol.2000，80(4)：1291-1335)。腫瘤壞死因子(tumor?necrosis?factor，TNFsuperfamily，member?2，NM_000594)具有廣泛的生物學功能，運動可以改變機體和細胞內的能量代謝狀態，TNF-α可能做為一種重要的調節因子參與機體的能量代謝的調節過程(焦廣發，何玉秀.運動對腫瘤壞死因子-α的影響研究進展.中國運動醫學雜志.2007，26(1)：116-119)。結合珠蛋白(haptoglobin?NM_005143，HP)是一種重要的血管生成因子，它促進新生血管的內皮細胞生長和分化，Hp對側枝血管的發育和組織修復也具有重要意義，Hp還具有調節機體免疫功能和抗菌作用等生物學功能(De?Kleijn?DP，SmeetsMB，Kemmeren?PP，et?al.Acute-phase?protein?haptoglobin?is?a?cell?migration?factorinvolved?in?arterial?restructuring.FASEB?J.2002，16(9)：1123-1125)。RAD1同源物(RAD1，NM_002853)在保持基因組穩定性方面發揮重要監視作用，它既可以監視損傷激活細胞周期的調控，又在單堿基切除修復中發揮作用(Guan?X，Bai?H，Shi?G，et?al，Thehuman?checkpoint?sensor?Rad9-Rad1-Hus1?interacts?with?and?stimulates?NEIL1glycosylase.Nucleic?Acids?Res.2007，35(8)：2463-2472)。缺氧誘導因子1α(hypoxia-inducible?factor?1，alpha?subunit；HIF1A，NM_001530)是在哺乳動物組織中廣泛存在的轉錄因子，組織處于缺氧狀態時它發揮重要的轉錄和基因調控作用，在運動員耐力訓練中，骨骼肌中最先對缺氧狀態發生反應的是HIF1A，它可以在分子水平上調糖酵解，促進組織適應缺氧環境(Mason?S，Johnson?RS.The?role?of?HIF-1?in?hypoxicresponse?in?the?skeletal?muscle.Adv?Exp?Med?Biol.2007，618：229-244)。胰島素樣生長因子1(insulin-like?growth?factor?1，IGF1，NM_000618)作用于關節軟骨，可刺激軟骨細胞分裂增殖，作用于肌肉，可以刺激肌肉蛋白合成，促進細胞分化，促進成肌細胞和肌管生長，加速創傷肌肉的愈合(陳世益，李云霞，馬昕，等.外源性胰島素樣生長因子-2促進骨骼肌損傷修復的實驗研究.中國運動醫學雜志.2002，21(4)：340-345)。這些基因在血液中都有表達。