[發明專利]一種同時檢測人血液中的11個運動相關基因和4個內參基因的基因表達的方法無效
| 申請號: | 201010100753.1 | 申請日: | 2010-01-26 |
| 公開(公告)號: | CN101851674A | 公開(公告)日: | 2010-10-06 |
| 發明(設計)人: | 田亞平;李立青 | 申請(專利權)人: | 中國人民解放軍總醫院 |
| 主分類號: | C12Q1/68 | 分類號: | C12Q1/68 |
| 代理公司: | 北京君智知識產權代理事務所 11305 | 代理人: | 鄭明 |
| 地址: | 100853*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 同時 檢測 血液 中的 11 運動 相關 基因 內參 表達 方法 | ||
1.一種同時檢測人血液中的11個運動相關基因和4個內參基因的基因表達的方法,其特征在于這些基因是人的睫狀神經營養因子基因、腎上腺素能β2受體基因、瘦素受體基因、轉化生長因子-β1基因、線粒體解偶聯蛋白2基因、磷酸脂酶C-γ1基因、腫瘤壞死因子基因、結合珠蛋白基因、RAD1同源物基因、缺氧誘導因子1α基因和胰島素樣生長因子1基因,四個內參基因為組蛋白脫乙酰化酶基因、3-磷酸甘油醛脫氫酶基因、18s-rRNA基因和β-肌動蛋白基因,其表達的方法包括下述步驟:
(1)設計針對每個基因的RT引物和PCR引物如序列1~30所述序列;
(2)委托生物公司合成引物,并用HPLC純化;
(3)收集優秀運動員全血標本并提取樣品RNA,在PCR儀上進行RT和PCR反應;
(4)將PCR反應產物上樣到BECKMAN公司的GenomeLabTM?GeXP多重基因表達遺傳分析系統儀器上,通過毛細管電泳分離PCR產物;用多重基因表達遺傳分析系統上配套軟件eXpressMap分析結果,導出數據。
2.根據權利要求1所述一種同時檢測人的11個運動相關基因和4個內參基因的基因表達的方法,其特征在于所述的RT反應時引物的濃度如下:
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