[發(fā)明專利]通過SERPINE2來調(diào)節(jié)膠原和平滑肌肌動蛋白表達(dá)的組合物和方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200980155346.6
• 申請日: 2009-11-25
• 公開（公告）號: CN102292101A
• 公開（公告）日: 2011-12-21
• 發(fā)明（設(shè)計）人: A.布拉斯;K.沙利文;J.芬納;E.博希;K.博伊爾;B.旺格;K.皮爾斯;K.巴維;A.達(dá)斯;F.法雷爾;P.西瓦庫馬
• 申請（專利權(quán)）人: 五佳醫(yī)療股份有限公司;森托科研究及發(fā)展股份有限公司
• 主分類號: A61K38/57
• 分類號: A61K38/57;C07K14/81
• 代理公司: 北京市柳沈律師事務(wù)所 11105
• 代理人: 張紅春

發(fā)明背景

有許多不同類型的肺病涉及肺纖維化，諸如特發(fā)性肺纖維化(idiopathicpulmonary?fibrosis，IPF)、急性肺損傷(ALI)、急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)、哮喘、和慢性阻塞性肺病(chronic?obstructive?pulmonary?disease，COPD)。Howell?et?al.，Am.J.Path.159：1383-1395(2001)，U.S.Patent?Publ.No.2009/0136500?A1。

例如，特發(fā)性肺纖維化(IPF)是間質(zhì)性肺病的一種常見形式，特征在于成纖維細(xì)胞增殖和過度膠原沉積。Hardie等，Am.J.of?Respir.Cell?Mol.Biol.327：309-321(2007)。IPF可源自慢性炎性過程，其啟動細(xì)胞外基質(zhì)在間質(zhì)中的病灶性積聚。或者，IPF可源自肺上皮損傷，其可導(dǎo)致異常傷口愈合及過度細(xì)胞外基質(zhì)形成。至今，沒有針對IPF的有效療法。Hardie等，(2007)；Meltzer等，Orphanet?Journal?of?Rare?Diseases，3：8(2008)。

肺成纖維細(xì)胞變成成肌纖維細(xì)胞(myofibroblast)的轉(zhuǎn)變是特發(fā)性肺纖維化和其它肺病，諸如慢性阻塞性肺病(COPD)的一項(xiàng)病理生理學(xué)特征。Dunkern等，Eur?J?Pharmacol.572(1)：12-22(2007)。

抗纖維蛋白溶解活性水平據(jù)報告在IPF患者的肺泡液中降低。Chapman等，Am.Rev.Respir.Dis.133：437-443(1986)。纖溶酶原活化物抑制劑(PAI-1)抗原(也稱作SERPINE1)在肺液中的水平和PAI-2抗原(也稱作SERPINB2)在肺細(xì)胞溶胞物中的水平據(jù)報告在患者中比在正常受試者中要更高。同前。PAI-1涉及肺纖維化。Gharee-Kermani等，Expert?Opin.Investig.Drugs17：905-916，2008。尿激酶纖溶酶原活化物(uPA)是血管外組織中纖維蛋白溶解的主要活化物。同前。PAI-1抑制uPA。同前。如此，纖溶酶原系統(tǒng)的蛋白水解特性可在調(diào)控肺修復(fù)和纖維化中發(fā)揮重要作用。同前。

SERPINE2是一種不可逆的細(xì)胞外絲氨酸蛋白酶抑制劑。它在胰、結(jié)腸、和胃的癌癥中過表達(dá)。Neesse等，Pancreatology?7：380-385，2007。SERPINE2也稱作蛋白酶微管連接蛋白I(PN-1)和神經(jīng)膠質(zhì)衍生微管連接蛋白(GDN)。SERPINE2也抑制細(xì)胞外尿激酶纖溶酶原活化物。Scott等，J.Biol.Chem.258：4397-4403，1983。

用SERPINE2轉(zhuǎn)染胰腺癌細(xì)胞系引起異種移植物腫瘤的局部侵襲力增強(qiáng)，伴有侵襲性腫瘤中的細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)生成大大升高。Buchholz等，Cancer?Research?63：4945-4951(2003)。ECM沉積物對I型膠原、纖連蛋白、和層粘連蛋白呈陽性。同前。

SERPINE2蛋白被發(fā)現(xiàn)在小鼠和人類肺中表達(dá)。DeMeo等，Am.J.Hum.Gen.78：253-264(2006)。這篇論文提出SERPINE2過表達(dá)與慢性阻塞性肺病有關(guān)聯(lián)。SERPINE2被證明是胰蛋白酶樣絲氨酸蛋白酶，諸如凝血酶、胰蛋白酶、纖溶酶、和尿激酶的細(xì)胞外抑制劑。同前。

SERPINE2由成纖維細(xì)胞分泌。Farrell等，J.Cell?Physiol.134：179-188，1988。SERPINE2與細(xì)胞外環(huán)境中的某些絲氨酸蛋白酶，包括凝血酶、尿激酶、和纖溶酶形成復(fù)合物，然后被細(xì)胞內(nèi)化并降解。同前。SERPINE2存在于成纖維細(xì)胞的表面上，結(jié)合至細(xì)胞外基質(zhì)。同前。

自硬皮病患者的皮膚損害分離的成纖維細(xì)胞過表達(dá)膠原和其它基質(zhì)成分。Strehlow等，J.Clin.Invest.103：1179-1190(1999)。SERPINE2在硬皮病成纖維細(xì)胞中過表達(dá)。同前。SERPINE2在小鼠3T3成纖維細(xì)胞中的瞬時或穩(wěn)定表達(dá)分別提高膠原α-1(I)啟動子活性或內(nèi)源膠原轉(zhuǎn)錄物水平。同前。在其活性位點(diǎn)處誘變的SERPINE2未能提高膠原啟動子活性。同前。SERPINE2以反義取向的過表達(dá)表現(xiàn)出抑制小鼠3T3成纖維細(xì)胞中來自膠原啟動子的表達(dá)。同前。在Strehlow等，1999中，進(jìn)行了人類SERPINE2點(diǎn)突變，R364K和S365T，并確認(rèn)了缺乏與凝血酶的更高級復(fù)合物的形成。