[發明專利]生物滅菌指示組合物、制品和方法無效

申請號：	200980149627.0	申請日：	2009-10-15
公開（公告）號：	CN102245217A	公開（公告）日：	2011-11-16
發明（設計）人：	塞拉嘉·常德拉帕蒂;希瑟·M·韋布;魏愛平	申請（專利權）人：	3M創新有限公司
主分類號：	A61L2/28	分類號：	A61L2/28;C12Q1/18;C12M1/40
代理公司：	中原信達知識產權代理有限責任公司 11219	代理人：	張穎;樊衛民
地址：	美國明***	國省代碼：	美國;US
權利要求書：	查看更多	說明書：	查看更多
摘要：
搜索關鍵詞：	生物滅菌指示組合制品方法
鉆瓜網技術展會專利詞庫專利權人專利榜在售專利公布日期熱門專利

【說明書】：

相關專利申請的交叉引用

本申請要求2008年10月17日提交的美國臨時申請號61/196414的權益，該臨時申請以引用方式全文并入本文。

背景技術

主要在衛生保健行業中，但同樣在許多其他行業應用中，有必要對用于器材如醫療器械、儀器和其他非一次性制品進行滅菌的過程的有效性進行監控。在這些情形中，滅菌一般定義為完全破壞包括諸如病毒和孢子的結構在內的所有的活微生物的過程。作為標準操作，醫院會將滅菌狀況指示器與一批物品放在一起以測試滅菌過程的致死率。生物滅菌指示器和化學滅菌指示器都一直得到利用。

標準類型的生物滅菌指示器包括已知數量的試驗微生物，例如嗜熱脂肪芽孢桿菌(Bacillus?stearothermophilus)或枯草芽孢桿菌(Bacillus?subtilis)孢子，這些孢子對滅菌過程的抵抗力比大多數污染性生物強許多倍。在指示器暴露于滅菌過程后，將孢子在營養培養基中進行溫育，以確定是否有任何孢子從該滅菌過程存活下來，如有孢子長出則表明滅菌過程不足以破壞所有的微生物。在另一個例子中，在進行了滅菌過程后，測定可與孢子存活力相關聯的酶的活性。盡管這方面已取得了進展，但進行確切測定所需的時間可能過長。

現有的化學滅菌指示器可在滅菌過程結束時立即進行讀數。但是，結果僅表明存在某種特定條件，例如表明存在某種特定化學品或一定時間段的某個溫度。

通常認為，活生物對所有實際存在的條件的反應，是檢驗滅菌過程實現滅菌有效性的更直接可靠的試驗。因此，對于能指示滅菌過程的有效性而在滅菌過程完成后又沒有過長的延遲時間的生物滅菌指示器，一直存在著需求。

發明內容

本發明提供生物滅菌組合物、包含該組合物的滅菌指示器以及用該指示器確定滅菌過程的有效性的方法。該組合物包含能抵抗滅菌過程的、在其萌發和初始長出期間含有活性蛋白酶的孢子，例如從滅菌過程存活下來的孢子。在某些實施例中，該活性蛋白酶如果存在的話，可在一段短的溫育時間期間和/或之后被檢測到。該活性蛋白酶是在標記的蛋白酶底物的存在下檢測到的。該底物標記有一種或多種染料基團，所述染料基團中的至少一種在該底物的肽部分被該活性蛋白酶切割時會發生可檢測的變化。該標記的蛋白酶底物至少在用于溫育所述孢子的溫度下是穩定的，并且在某些實施例中，優選在滅菌溫度下是穩定的。

因此，在一個實施例中，提供滅菌指示組合物，其包含：

多個滅菌過程抗性孢子，所述孢子在其萌發和初始長出期間含有活性蛋白酶；

包含至少一種標記的蛋白酶底物和至少一種供所述孢子萌發的營養物的萌發培養基；

其中該培養基基本上不含a)該多個孢子所含的活性蛋白酶以外的任何活性蛋白酶，和b)該至少一種標記的蛋白酶底物以外的任何蛋白酶底物、任何來源于該多個孢子的蛋白酶底物以外的任何蛋白酶底物、以及任何不與該標記的蛋白酶底物競爭該活性蛋白酶的蛋白酶底物以外的任何蛋白酶底物；并且

其中該至少一種標記的蛋白酶底物包含能被該活性蛋白酶切割且標記有一種或多種染料基團的肽，所述染料基團中的至少一種在該肽被該活性蛋白酶切割時會發生可檢測變化，并且其中該標記的蛋白酶底物至少在用于溫育所述孢子的溫度下是穩定的。

在另一個實施例中，提供滅菌過程指示器，其包含：

載體，其承載多個滅菌過程抗性孢子，所述孢子在其萌發和初始長出期間含有活性蛋白酶；

微生物不能透過并且不能透過滅菌劑的容器，該容器含有萌發培養基，該萌發培養基包含至少一種標記的蛋白酶底物和至少一種供所述孢子萌發的營養物；

其中該至少一種標記的蛋白酶底物包含能被該活性蛋白酶切割且標記有一種或多種染料基團的肽，所述染料基團中的至少一種在該肽被該活性蛋白酶切割時會發生可檢測變化，并且其中該標記的蛋白酶底物至少在用于溫育所述孢子的溫度下是穩定的；并且

其中該載體靠近該容器并且與該萌發培養基隔開。

在又一個實施例中，提供確定滅菌過程的有效性的方法，該方法包括：

提供滅菌過程指示器，其包含：