[發明專利]生物滅菌指示組合物、制品和方法

無效

• 申請號: 200980149627.0
• 申請日: 2009-10-15
• 公開（公告）號: CN102245217A
• 公開（公告）日: 2011-11-16
• 發明（設計）人: 塞拉嘉·常德拉帕蒂;希瑟·M·韋布;魏愛平
• 申請（專利權）人: 3M創新有限公司
• 主分類號: A61L2/28
• 分類號: A61L2/28;C12Q1/18;C12M1/40
• 代理公司: 中原信達知識產權代理有限責任公司 11219
• 代理人: 張穎;樊衛民

1.一種滅菌指示組合物，其包含：

多個滅菌過程抗性孢子，所述孢子在其萌發和初始長出期間含有活性蛋白酶；

萌發培養基，其包含至少一種標記的蛋白酶底物和至少一種供所述孢子萌發的營養物；

其中所述培養基基本上不含a)所述多個孢子所含的活性蛋白酶以外的任何活性蛋白酶，和b)所述至少一種標記的蛋白酶底物以外的任何蛋白酶底物、任何來源于所述多個孢子的蛋白酶底物以外的任何蛋白酶底物、以及任何不與所述標記的蛋白酶底物競爭所述活性蛋白酶的蛋白酶底物以外的任何蛋白酶底物；并且

其中所述至少一種標記的蛋白酶底物包含能被所述活性蛋白酶切割且標記有一種或多種染料基團的肽，所述染料基團中的至少一種在所述肽被所述活性蛋白酶切割時會發生可檢測變化，并且其中所述標記的蛋白酶底物至少在用于溫育所述孢子的溫度下是穩定的。

2.根據權利要求1所述的組合物，其中所述多個滅菌過程抗性孢子選自嗜熱脂肪地芽孢桿菌(Gb.stearothermophilus)、萎縮芽孢桿菌(B.atrophaeus)、巨大芽孢桿菌(B.megaterium)、生孢梭菌(Clostridium?sporogenes)、凝結芽孢桿菌(B.coagulans)、以及它們的組合。

3.根據權利要求1或權利要求2所述的組合物，其中所述活性蛋白酶當經歷了剛好足以將至少1×10⁵個孢子的群體降低到零個孢子的滅菌過程時只具有本底水平的活性，所述零個孢子是由無孢子長出測得；并且

當經歷了足以將至少1×10⁵個孢子的群體降低至少一個對數單位但降低到大于零個孢子的群體的滅菌過程時，具有大于本底水平的活性的活性水平；

其中活性水平由如下方法測量：

使有效量的所述至少一種標記的蛋白酶底物與所述活性蛋白酶反應，以產生所述一種或多種染料基團中的至少一種的可檢測變化，并且

測量所述可檢測變化。

4.根據權利要求1、2和3中任一項所述的組合物，其中所述活性蛋白酶是萌發特異性蛋白酶。

5.根據權利要求1-4中任一項所述的組合物，其中所述標記的蛋白酶底物在用于溫育所述孢子的至少60℃的溫度下是穩定的。

6.根據權利要求1-5中任一項所述的組合物，其中所述標記的蛋白酶底物是標記的蛋白質，其中所述蛋白質被所述活性蛋白酶切割。

7.根據權利要求6所述的組合物，其中所述標記的蛋白酶底物選自標記的酪蛋白、標記的膠原、標記的明膠、標記的纖維蛋白原、以及它們的組合，以上每一種都基本上不含任何活性蛋白酶。

8.根據權利要求1-7中任一項所述的組合物，其中所述可檢測變化是熒光強度的變化。

9.一種滅菌過程指示器，其包括：

載體，其承載多個滅菌過程抗性孢子，所述孢子在其萌發和初始長出期間含有活性蛋白酶；

不能透過微生物且不能透過滅菌劑的容器，所述容器含有包括至少一種標記的蛋白酶底物和至少一種供所述孢子萌發的營養物的萌發培養基；

其中所述培養基基本上不含a)所述多個孢子所含的活性蛋白酶以外的任何活性蛋白酶，和b)所述至少一種標記的蛋白酶底物以外的任何蛋白酶底物、任何來源于所述多個孢子的蛋白酶底物以外的任何蛋白酶底物、以及任何不與所述標記的蛋白酶底物競爭所述活性蛋白酶的蛋白酶底物以外的任何蛋白酶底物；并且

其中所述至少一種標記的蛋白酶底物包含能被所述活性蛋白酶切割且標記有一種或多種染料基團的肽，所述染料基團中的至少一種在所述肽被所述活性蛋白酶切割時會發生可檢測變化，并且其中所述標記的蛋白酶底物至少在用于溫育所述孢子的溫度下是穩定的；并且

其中所述載體鄰近所述容器且與所述萌發培養基隔開。

10.根據權利要求9所述的指示器，其中所述多個滅菌過程抗性孢子選自嗜熱脂肪地芽孢桿菌、萎縮芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌、生孢梭菌、凝結芽孢桿菌、以及它們的組合。