[發(fā)明專利]固定化基底及其制備方法有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 200980147877.0 | 申請(qǐng)日： | 2009-12-04 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN102246041A | 公開（公告）日： | 2011-11-16 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 南高一;都筑博彥;上田宏;伊原正喜 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 富士膠片株式會(huì)社;國(guó)立大學(xué)法人東京大學(xué) |
| 主分類號(hào)： | G01N33/543 | 分類號(hào)： | G01N33/543;C07K19/00;G01N33/547 |
| 代理公司： | 中科專利商標(biāo)代理有限責(zé)任公司 11021 | 代理人： | 陳平 |
| 地址： | 日本國(guó)*** | 國(guó)省代碼： | 日本;JP |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 固定 基底 及其 制備 方法 | ||
1.一種固定抗體片段的基底，包括基底和至少一組抗體片段，
其中每組抗體片段包括至少兩種類型的分開的抗體片段，
所述至少兩種類型的分開的抗體片段包括至少一種類型的標(biāo)記抗體片段和至少一種類型的接受抗體片段，所述標(biāo)記抗體片段具有用發(fā)光物質(zhì)標(biāo)記的標(biāo)記位點(diǎn)，所述接受抗體片段具有接受來自所述標(biāo)記抗體片段的發(fā)射的接受位點(diǎn)，并且
所述至少一種類型的標(biāo)記抗體片段和所述至少一種類型的接受抗體片段能夠協(xié)作地識(shí)別一種類型的抗原并且以一定的位置關(guān)系獨(dú)立地固定在所述基底上，所述位置關(guān)系允許一組中的每種抗體片段結(jié)合相同的所述抗原。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的固定抗體片段的基底，其中所述至少兩種類型的抗體片段包括VH-區(qū)多肽和VL-區(qū)多肽。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或權(quán)利要求2所述的固定抗體片段的基底，還包括聚合物層并且其中所述至少兩種類型的抗體片段被固定在所述聚合物層上。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的固定抗體片段的基底，其中所述聚合物層的厚度為1nm至0.5mm。
5.根據(jù)權(quán)利要求3或權(quán)利要求4所述的固定抗體片段的基底，其中所述聚合物層通過自組裝單分子層結(jié)合至所述基底上。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的固定抗體片段的基底，其中所述自組裝單分子層的厚度為0.2nm至10μm。
7.根據(jù)權(quán)利要求3-6中任一項(xiàng)所述的固定抗體片段的基底，其中所述聚合物是多糖。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)所述的固定抗體片段的基底，其中所述發(fā)光物質(zhì)是選自熒光染料或熒光蛋白中的至少一種。
9.根據(jù)權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)所述的固定抗體片段的基底，其中在所述標(biāo)記抗體片段和所述接受抗體片段之間發(fā)生熒光共振能量轉(zhuǎn)移。
10.根據(jù)權(quán)利要求1-9中任一項(xiàng)所述的固定抗體片段的基底，其用于基于所述至少兩種類型的抗體片段和所述抗原之間的結(jié)合反應(yīng)的生物反應(yīng)器或生物傳感器。
11.一種制備固定抗體片段的基底的方法，包括：
使至少兩種類型的分開的抗體片段與一種類型的抗原接觸，并且形成復(fù)合物，由此每種所述抗體片段與所述抗原結(jié)合，所述至少兩種類型的分開的抗體片段包括至少一種類型的標(biāo)記抗體片段和至少一種類型的接受抗體片段并且能夠協(xié)作地識(shí)別所述抗原，所述標(biāo)記抗體片段具有用發(fā)光物質(zhì)標(biāo)記的標(biāo)記位點(diǎn)，所述接受抗體片段具有接受來自所述標(biāo)記抗體片段的發(fā)射的接受位點(diǎn)；
使所述復(fù)合物經(jīng)由所述復(fù)合物中的所述抗體片段固定在基底上；以及
從所述復(fù)合物中去除所述抗原，獲得所述固定抗體片段的基底，其中所述抗體片段以一定的位置關(guān)系獨(dú)立地固定在所述基底上，所述位置關(guān)系允許每種所述抗體片段結(jié)合相同的所述抗原。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的制備固定抗體片段的基底的方法，其中所述抗體片段包括VH-區(qū)多肽和VL-區(qū)多肽。
13.根據(jù)權(quán)利要求11或權(quán)利要求12所述的制備固定抗體片段的基底的方法，其中所述接觸包括：混合所述抗體片段和所述抗原，使得抗原的數(shù)目與由抗體片段的組合形成的分子價(jià)的比率為0.1∶1至10∶1。
14.根據(jù)權(quán)利要求11-13中任一項(xiàng)所述的制備固定抗體片段的基底的方法，其中進(jìn)行所述去除使得減小所述復(fù)合物中所述抗體片段和所述抗原的親和力。
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