[發明專利]作為蛋白酶抑制劑、用于保持腸中肽完整性的膽汁酸和雙胍

有效

• 申請號: 200980146495.6
• 申請日: 2009-10-01
• 公開（公告）號: CN102307582A
• 公開（公告）日: 2012-01-04
• 發明（設計）人: 羅杰·R·C·紐;格蘭·特拉韋爾
• 申請（專利權）人: 阿克塞斯有限公司
• 主分類號: A61K31/575
• 分類號: A61K31/575;A61K31/155;A61K38/00
• 代理公司: 北京英賽嘉華知識產權代理有限責任公司 11204
• 代理人: 王達佐;洪欣

發明領域

本發明涉及保持腸中肽完整性的方法。特別是，本發明涉及某些化合物作為腸蛋白酶抑制劑的新用途。

技術背景

以下技術背景的討論僅僅想要促進對本發明的理解。討論不是確認或承認所涉及的任何材料在申請的優先權日起或之前是現有技術的公知常識的一部分。

肽，尤其是諸如蛋白的多肽日益視為用于治療出現于腸(胃腸道)疾病的期望試劑。蛋白治療劑通常基于具有悠久藥用歷史的天然產物，其比對身體的影響大部分不為人所知的新合成小分子具有更高的安全性。而且蛋白可以表現出高度的特異性和選擇性，同時可以設計為利用其大尺寸以表現出多功能性，這使得它們同時與兩個或更多個不同靶標相互作用。

諸如超氧化物歧化酶的具有抗氧化活性的蛋白是這種治療應用的實例。其他實例是單克隆抗體，其可以通過與入侵腸的感染性生物上的位點結合來充當抗感染藥。或者，這樣的抗體可以與腸細胞上的受體位點結合，并且干擾感染性生物的粘附過程和建群。此外，這些抗體可以與免疫系統的細胞相互作用，以刺激它們防治感染性疾病的活性。其他類型的治療性肽包括諸如食欲抑制劑的肽激素。

在腸中使用肽的一個重要缺點是它們對腸蛋白酶的極端敏感性。這些蛋白酶在胃(例如胃蛋白酶)和腸的上部中都可以發現，并且演變為使得消化道能夠通過蛋白水解將作為食物攝取的肽分解為氨基酸，其可以通過受體介導的機制作為營養物吸收。

如果治療性或預防性肽意圖作用的部位是小腸，那么通過將所述肽置于腸溶膠囊、片劑或其他裝置中可以防止其在胃中分解，該腸溶膠囊、片劑或其他裝置在胃中發現的低pH下抗溶解，但在較高pH下分解以將肽釋放到小腸中，如十二指腸、空腸或回腸。然而，小腸中發現的蛋白酶(尤其是絲氨酸蛋白酶、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、彈性蛋白酶和羧肽酶)的功能是這樣的，一旦肽從這種裝置釋放，它們可以迅速分解和破壞肽。這顯然限制了口服治療性肽的功效，而防止它們被蛋白酶降解的方法將顯著增強其表現。

雖然有許多充當蛋白酶抑制劑的試劑為本領域技術人員所知，但是幾乎沒有適合這種特定應用。大部分已知的抑制劑，如木瓜蛋白酶抑制劑(antipain)、亮肽素，僅用于研究目的，并不是人體給藥可以接受的。一些抑制劑，如氟磷酸二異丙酯或苯甲基磺酰氟，具有高度效力，但是顯示出非常廣泛的特異性，所以有在除腸以外的不期望的身體部位發揮其功能的風險。另一方面，其他抑制劑，如用于治療HIV的一類新蛋白酶抑制劑，對其抑制的蛋白酶的性質具有選擇性，以致于其對腸中的絲氨酸蛋白酶沒有效果。兩種已經給予人的絲氨酸蛋白酶抑制劑為抑肽酶和大豆胰蛋白酶抑制劑。然而，這些抑制劑合成相對昂貴，并且在藥物中需要包含如此高的水平，因此最終產品的成本將妨礙日常使用藥物的制造。

本發明試圖解決或至少改善一個或更多與現有技術設備相關的問題。

發明描述

本發明人發現與腸蛋白酶的相互作用以前從未被意識到的某些化合物意外地抑制腸蛋白酶。這使得能夠利用它們來保護肽不被蛋白水解(即被腸蛋白酶降解)。鑒定為具有該活性的化合物為雙胍、某些膽汁酸以及這些化合物的藥學可接受的鹽。

因此，本發明提供了用作一種或多種腸蛋白酶抑制劑的化合物，該化合物為膽汁酸、雙胍或者膽汁酸或雙胍的藥學可接受的鹽，其中所述膽汁酸具有式(I)，

其中，R¹、R²和R³各自選自-H和-OH，R⁴選自-OH和-NHCH₂CO₂H，其中，如果R¹和R²為OH并且R³為H，那么R⁴必須是-NHCH₂CO₂H。

本發明的化合物抑制腸蛋白酶的機理是結構特異性，推測是化合物與蛋白酶上的受體位點直接結合相互作用的結果。其證據是諸如膽酸、牛磺膽酸和牛磺脫氧膽酸的其他膽汁酸不具有這一抑制作用(見圖5和6)。因此，雖然抑制作用在相對高濃度的膽汁酸、雙胍或其衍生物下顯示其自身，但是可以排除基于如表面活性劑相互作用或pH變化的非特異性抑制路線。在適當條件下，對蛋白酶活性的抑制可以為100％。

抑制活性可以用熒光或顯色肽底物來證明。用一定范圍的不同底物肽觀察到了抑制作用，這表明該作用不是肽底物與抑制劑之間特異性相互作用的結果。