[發明專利]抗TGF-β受體II抗體

有效

• 申請號: 200980144391.1
• 申請日: 2009-10-29
• 公開（公告）號: CN102209727A
• 公開（公告）日: 2011-10-05
• 發明（設計）人: 吳嫣
• 申請（專利權）人: 伊姆克羅尼責任有限公司
• 主分類號: C07K16/28
• 分類號: C07K16/28;A61K39/395;A61P35/00
• 代理公司: 北京市中咨律師事務所 11247
• 代理人: 張莉;黃革生

技術領域

本發明涉及醫學領域，具體來說涉及：結合人轉化生長因子β受體II(TGFβRII)的抗體、包含該抗體的藥物組合物、以及使用該抗體的方法，例如用于治療癌癥、纖維化和纖維化疾病。

背景技術

TGFβ是調節細胞生長和分化、運動、胞外基質產生和免疫功能的多效細胞因子。TGFβ具有3種哺乳動物同種型TGFβ-1、TGFβ-2和TGFβ-3，每種具有不同的體內功能。所有3種TGFβ都使用相同的受體信號傳導系統。TGFβ與TGFβRII的結合是起始激活TGFβ信號傳導途徑的關鍵步驟，該途徑導致Smad2的磷酸化、以及活化的Smad2/Smad4復合物移位至細胞核以調節基因表達。

JP?2004/121001A公開了以高親和性(8.06×10^-10和1.91×10^-9M的KD)結合人TGFβRII以治療腎臟疾病和組織纖維化的人單克隆抗體(mAb)。該申請也公開了該mAb抑制TGFβ誘導的角質形成細胞生長(IC₅₀平均值為2.17-3.89、3.17-4.95和3.21-5.07μg/ml)。據報道，使用TGFβRII的完全人單克隆抗體可有效降低大鼠抗-Thy-1腎炎中胞外基質的沉積。(Kasuga，H.等人，Kidney?Int’l，第60卷(2001)1745-1755)。

迄今為止，尚未公開具有以下特性的高特異性、高親和性抗-TGFβRII抗體，這樣的抗體因此是需要的：以極高親和性特異性結合人TGFβRII的胞外結構域，阻斷人TGFβ1、TGFβ2和TGFβ3與人TGFβRII的結合、抑制血管發生、抑制腫瘤細胞生長、抑制癌細胞的遷移和侵襲、降低膠原沉著和肝功能、抑制配體誘導的T細胞調節、或聯合細胞毒性劑抑制腫瘤生長。

發明概述

本發明尋求提供滿足這些需求的新的分離的抗-TGFβRII?mAb。TGFβRII是哺乳動物的，且優選是人的。本發明的抗體能夠具有一種或多種以下活性：1)呈現對人TGFβRII的胞外結構域的高親和性結合；2)阻斷TGFβRII配體(TGFβ1、TGFβ2和TGFβ3)與TGFβRII的結合，由此抑制TGFβ誘導的Smad2磷酸化；3)內在化TGFβRII，其可獨立于配體-受體相互作用充當信號傳導下調機制；4)抑制配體誘導的TGFβRII信號傳導途徑；5)抑制TGFβRII介導的細胞活性；6)體外和體內抑制腫瘤生長；且另外更優選地還可具有一種或多種以下活性：7)通過降低TGFβ誘導的血管內皮生長因子A(VEGF-A)分泌而抑制血管發生；8)抑制癌細胞的遷移和侵襲，9)降低膠原沉著和肝功能異常；10)抑制配體誘導的T細胞調節以形成具有免疫抑制作用的Treg細胞；或11)聯合細胞毒劑抑制腫瘤生長。

與TGFβRII特異性結合并中和TGFβRII介導的活性的高親和性單克隆抗體特別可用作治療性生物劑用于治療由TGFβ信號傳導介導的疾病。

根據本發明的第一方面，提供了分離的抗體，其在室溫(20-25℃)以小于100pM的K_D與人TGFβRII的胞外結構域特異性結合。

一方面，本發明的抗體通過ELISA測定以小于1.0nM的IC₅₀阻斷人TGFβ1、TGFβ2或TGFβ3與人TGFβRII的結合。

另一方面，本發明的抗體以小于30nM的IC₅₀抑制TGFβ誘導的Smad2磷酸化。

又一方面，本發明的抗體包含與TGFβRII特異性結合的抗體，該抗體包含：

i)具有序列GGSISNSYF(SEQ?ID?NO：1)的CDRH1、具有序列SFYYGEKTYYNPSLKS(SEQ?ID?NO：2)的CDRH2、具有序列GPTMIRGVIDS(SEQ?ID?NO：3)的CDRH3、具有序列RASQSVRSYLA(SEQ?IDNO：10)的CDRL1、具有序列DASNRAT(SEQ?ID?NO：11)的CDRL2和具有序列QQRSNWPPT(SEQ?ID?NO：12)的CDRL3；

ii)具有序列GSGYRFTSY(SEQ?ID?NO：4)的CDRH1、具有序列IIYPGDSDTRYSPSFQG(SEQ?ID?NO：5)的CDRH2、具有序列HGRGYNGYEG(SEQ?ID?NO：6)的CDRH3、具有序列RASQGISSWLA(SEQID?NO：13)的CDRL1、具有序列AASSLQS(SEQ?ID?NO：14)的CDRL2和具有序列QQYNSYPWT(SEQ?ID?NO：15)的CDRL3；或