[發明專利]由超產酵母生產角鯊烯

有效

• 申請號: 200980139111.8
• 申請日: 2009-08-28
• 公開（公告）號: CN102257149A
• 公開（公告）日: 2011-11-23
• 發明（設計）人: M·布魯克
• 申請（專利權）人: 諾華有限公司
• 主分類號: C12P5/02
• 分類號: C12P5/02
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 余穎

1.一種制備含角鯊烯產品的方法，包括以下步驟：(a)獲取業已從培養期間高產率生產角鯊烯的酵母中純化的角鯊烯；和(b)將步驟(a)的角鯊烯與非角鯊烯組分組合形成含角鯊烯的產品。

2.一種制備水包油乳液的方法，包括以下步驟：(a)純化來自于培養期間高產率生產角鯊烯的酵母的角鯊烯；和(b)將步驟(a)純化的角鯊烯與水性組分組合形成水包油乳液。

3.一種制備水包油乳液的方法，包括以下步驟：(a)獲取業已從培養期間高產率生產角鯊烯的酵母中純化的角鯊烯；和(b)將步驟(a)純化的角鯊烯與水性組分組合形成水包油乳液。

4.如前述權利要求中任一項所述的方法，其中，所述酵母生產角鯊烯的產率為≥5％細胞干重。

5.如前述權利要求中任一項所述的方法，其中，所述酵母是釀酒酵母屬(Saccharomyces)的，例如是釀酒酵母(S.cerevisiae)。

6.如前述權利要求中任一項所述的方法，其中，所述酵母表達聚集于胞漿的截短HMGR酶。

7.如前述權利要求中任一項所述的方法，其中，所述酵母是經過改造的菌株，其相比未經改造的親本株超表達HMGR。

8.如前述權利要求中任一項所述的方法，其中，所述酵母是經過改造的菌株，其相比未經改造的親本株低表達酵母甾醇-24-甲基轉移酶和/或麥角甾-5，7，24(28)-三烯甘油酯-22-脫氫酶。

9.如前述權利要求中任一項所述的方法，其中，所述酵母表達突變氧化鯊烯環化酶。

10.如前述權利要求中任一項所述的方法，其中，所述酵母具有被破壞的角鯊烯環氧酶。

11.如前述權利要求中任一項所述的方法，其中，在能夠提高培養期間角鯊烯產率的因子存在下培養所述酵母。

12.如權利要求11所述的方法，其中，所述因子是烯丙胺，伏力康唑，6-氨基-2-正-戊基硫代苯并噻唑，硫胺或硫代氨基甲酸酯或鹽。

13.如前述權利要求中任一項所述的方法，其中，在角鯊烯純化之前，在部分無氧或完全無氧的條件下培養所述酵母。

14.如前述權利要求中任一項所述的方法，其中，在不含動物來源產物的調配培養基中培養所述酵母。

15.如前述權利要求中任一項所述的方法，其中，所述角鯊烯純度高于97％(重量)。

16.如權利要求2至15中任一項所述的方法，其中，所述水包油乳液含亞微米直徑的油滴。

17.如權利要求2至16中任一項所述的方法，其中，所述水包油乳液是微流化的乳液。

18.如權利要求2至17中任一項所述的方法，其中，所述水包油乳液含角鯊烯和聚山梨醇酯80。

19.一種制備免疫原性組合物的方法，包括：按照權利要求3至19中任一項所述的方法制備水包油乳液，將所得乳液與免疫原混合。

20.一種制備用于制備免疫原性組合物的試劑盒的方法，包括：按照權利要求3至19中任一項所述的方法制備水包油乳液，將所得乳液裝入第一容器，將該第一容器與含有免疫原的第二容器組合成試劑盒。

21.一種提高哺乳動物免疫應答的方法，包括給予所述哺乳動物按照權利要求19所述方法制備的免疫原性組合物，或使用權利要求20所述的試劑盒。

22.一種制備純化角鯊烯的方法，包括以下步驟：(a)在能使酵母高產率生產角鯊烯的條件下培養酵母；(b)從培養的酵母中純化角鯊烯，所得角鯊烯純度≥97％重量。