[發(fā)明專利]生物活性劑的囊封方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200980127005.8
• 申請日: 2009-05-05
• 公開（公告）號: CN102083423A
• 公開（公告）日: 2011-06-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: M·菲丹博伊盧;I·帕帕尼科勞烏
• 申請（專利權(quán)）人: 葛蘭素集團(tuán)有限公司
• 主分類號: A61K9/51
• 分類號: A61K9/51
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 劉辛;劉健

背景技術(shù)

很多藥物在大腦或眼中的靶標(biāo)處具有活性，為了使這些藥物到達(dá)它們的靶標(biāo)，它們必須穿過生物屏障，如血腦屏障。雖然一些分子能夠通過生物屏障，但是還有一些不能有效或事實(shí)上根本不能穿過這些屏障的其它分子。許多藥物也僅僅當(dāng)直接進(jìn)入靶標(biāo)組織時才有效，且如果不能到達(dá)這個靶標(biāo)組織，藥物實(shí)際上也不能起作用。因此，由于不能穿過這樣的生物屏障，很多可能有效的藥物不能在臨床上使用。

現(xiàn)有技術(shù)中已記述了很多方法以增強(qiáng)藥物穿透這些生物屏障的能力。

一種方法是改變屏障本身的功能。例如，滲透劑或擬膽堿藥物檳榔堿類(cholinomimetic?arecolines)，其能打開血腦屏障或者改變血腦屏障的穿透性(Saija?A等人，J?Pharm.Pha.42：135-138(1990))。

其它的方法是修飾藥物分子本身。例如，修飾蛋白以試圖穿過血腦屏障，包括使這些蛋白糖基化或者形成前藥(WO/2006/029845)。

還有另一方法是植入可控制釋放的聚合物，其從基質(zhì)系統(tǒng)直接將活性成分釋放進(jìn)入神經(jīng)組織。然而，如果直接植入大腦或骨髓，這種方法是浸入性的且需要外科手術(shù)介入(sable等人，美國專利4,833,666)，這存在的問題是需要病人的同意，且通常僅僅是在大腦內(nèi)隨給予的藥物一起進(jìn)行定位輸送，通常很快被排出(WO/2006/029845)。

為了克服這些局限，人們使用了藥物載體系統(tǒng)，然而，靶標(biāo)的藥物傳輸?shù)闹饕獑栴}是通過網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)(RES)尤其是通過肝和脾的巨噬細(xì)胞的注射的載體的快速調(diào)理(opsonisation)和攝取。

因此，仍然需要一種有效的方法，以將大分子(如蛋白質(zhì))輸送到大腦和眼中。具體而言，需要找到一種將大分子穿過血腦屏障的方法，所述大分子在進(jìn)入大腦時仍能保留活性，以及還能提供所需要的釋放動力學(xué)，保持蛋白質(zhì)的穩(wěn)定和活性，且能夠回避清除機(jī)制。

附圖說明

圖1所示為通過動態(tài)光散射(DLS)從納米粒子制劑中獲得的粒度數(shù)據(jù)，表明在懸液中有通過空心法制備的納米粒子存在。

圖1(a)所示為通過動態(tài)光散射對納米粒子懸液分析之后獲得的相關(guān)圖。

圖1(b)所示為納米粒子的多模態(tài)粒度分布(導(dǎo)出數(shù)據(jù))，繪圖以說明相對于粒度范圍的粒子群(數(shù)量)的分布。

圖1(c)所示為所示為納米粒子的多模態(tài)粒度分布(導(dǎo)出數(shù)據(jù))，繪圖以說明相對于粒度范圍的粒子群(數(shù)量)的分布。

圖1(d)所示為所示為納米粒子的多模態(tài)粒度分布(導(dǎo)出數(shù)據(jù))，繪圖以說明相對于粒度范圍的粒子群(數(shù)量)的分布。

圖2所示為經(jīng)SEM分析的納米粒子。

圖3所示為經(jīng)TEM的空心納米粒子的圖像，以及用于比較的固態(tài)PBCA納米粒子的疊加圖像。

圖4所示為單克隆IgG1(抗-CD23)的囊封效果的測量結(jié)果。

圖5所示為粒子的酶降解和通過ELISA的釋放的酶的分析之后得到的釋放曲線。

圖6所示為通過二喹啉甲酸測定(BCA測定)在空心PBCA納米粒子中測得的域抗體(雞蛋溶菌酶dAb)的囊封效果曲線。

圖7所示為為單克隆IgG1(抗-CD23)的囊封效果的測量結(jié)果。

發(fā)明內(nèi)容

在本發(fā)明的一個方面中，提供一種在微粒載體中囊封生物活性劑的方法，如在納米粒子中，或納米粒子中和上，或用納米粒子囊封蛋白和/或肽的方法，和通過在納米粒子中，或納米粒子中和上，或用納米粒子囊封以輸送蛋白和/或肽穿過血腦屏障的方法，以及通過在微粒載體中，或微粒載體中和上，或用微粒載體囊封以將蛋白和/或肽輸送到眼中的方法。

在本發(fā)明的另一實(shí)施方式中，提供一種微粒載體，其包括粒子形成物質(zhì)和生物活性劑如蛋白和/或肽，以將蛋白和/或肽從血液穿過血腦屏障輸送到腦或輸送到眼中。在本發(fā)明的再一實(shí)施方式中，提供納米粒子的組合物以及它們在治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)和/或眼的疾病或病癥中的用途。

發(fā)明詳述

本發(fā)明提供一種包括粒子形成物質(zhì)和生物活性劑的微粒載體，以及所述微粒載體的制備方法。

在一個實(shí)施方式中，本發(fā)明提供一種包括在空腔的水相中的生物活性劑的聚合物微粒載體。

在本發(fā)明的另一實(shí)施方式中，其提供在微粒載體中囊封生物活性劑以用于眼輸送的方法，該方法包括以下步驟：

a)在有機(jī)溶劑中溶解聚合物以形成聚合物溶液；

b)將含有生物活性劑的水溶液加入到聚合物溶液中以形成在連續(xù)有機(jī)相中的水相液滴的初級乳液；

c)使初級乳液與水介質(zhì)混合形成W/O/W乳液；以及