[發(fā)明專利]IL-1α抗體及使用方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200980125033.6
• 申請日: 2009-06-01
• 公開（公告）號: CN102112154A
• 公開（公告）日: 2011-06-29
• 發(fā)明（設計）人: J·西馬德
• 申請（專利權）人: 埃克斯生物科技公司
• 主分類號: A61K39/395
• 分類號: A61K39/395;C12N5/16;C07K16/00
• 代理公司: 北京安信方達知識產權代理有限公司 11262
• 代理人: 申基成;鄭霞

相關申請的交叉引用

本申請要求分別于2008年5月30日、2008年12月10日和2009年5月14日提交的美國臨時專利申請系列第61/057,586號、第61/121,391號和第61/178,350號的優(yōu)先權。

關于聯邦政府贊助的研究的聲明

不適用。

發(fā)明領域

本發(fā)明總的來說涉及免疫學、炎癥、癌癥、血管病癥和醫(yī)學領域。更具體地，本發(fā)明涉及特異性結合白細胞介素-1α(IL-1α)的抗體(Ab)以及使用這種抗體治療、預防或檢測與異常的IL-1α表達相關的病理的方法。

背景

IL-1α是促炎細胞因子，它在大量不同活性中發(fā)揮重要作用，所述大量不同活性包括炎癥、免疫應答、腫瘤轉移和血細胞生成。針對IL-1α的IgG自身抗體天然地存在于普通人群中并被認為有益于諸如動脈粥樣硬化等疾病。

概述

本發(fā)明基于完全人單克隆Ab(mAb)的開發(fā)，所述完全人單克隆抗體包含(i)抗原結合可變區(qū)，所述抗原結合可變區(qū)表現出對人IL-1α的非常高的結合親和力，和(ii)恒定區(qū)，所述恒定區(qū)對于通過C1q結合而活化補體系統(tǒng)以及對于與幾種不同的Fc受體結合都有效。本文描述的IL-1α特異性的mAb通過用人IgG1?mAb的恒定區(qū)取代人IgG4?mAb的恒定區(qū)而制得，所述人IgG4?mAb具有對人IL-1α特異性的可變區(qū)。

因此，本發(fā)明的特征是與人IL-1α特異性結合的純化的人IgG1?mAb，所述mAb包含與輕鏈共價連接的重鏈。所述重鏈可包含SEQ?ID?NO：9的氨基酸序列并且所述輕鏈可包含SEQ?ID?NO：11的氨基酸序列。

一組分離的核酸也在本發(fā)明之中，這組分離的核酸包含編碼與IL-1α特異性結合的人IgG1?mAb的重鏈的第一核酸，以及編碼與人IL-1α特異性結合的人IgG1?mAb的輕鏈的第二核酸。所述第一核酸可以編碼SEQ?ID?NO：9的氨基酸序列且所述第二核酸可以編碼SEQ?ID?NO：11的氨基酸序列。所述第一核酸可包含SEQ?ID?NO：10核苷酸序列且所述第二核酸可包含SEQ?ID?NO：12的核苷酸序列。

在另一方面，本發(fā)明的特征是一種表達載體，該表達載體包含編碼SEQ?ID?NO：9或SEQ?ID?NO：11的氨基酸序列的核酸。

本發(fā)明的另一個特征是包含一組分離的核酸的分離的宿主細胞(例如，哺乳動物細胞，諸如CHO細胞)，這組分離的核酸包含編碼與IL-1α特異性結合的人IgG1?mAb的重鏈的第一核酸，以及編碼與人IL-1α特異性結合的人IgG1?mAb的輕鏈的第二核酸。所述重鏈可包含SEQ?ID?NO：9的氨基酸序列并且輕鏈可包含SEQ?ID?NO：11的氨基酸序列。

本發(fā)明的特征還是殺傷表達人IL-1α的細胞的方法。該方法可包括使所述細胞接觸與人IL-1α特異性結合的純化的人IgG1?mAb的步驟。

抑制人細胞穿過基膜基質遷移的方法也在本發(fā)明之中。該方法可包括將與人IL-1α特異性結合的純化的mAb添加到包括基膜基質和人細胞的混合物中的步驟。

還在本發(fā)明中的是抑制IL-1α誘導的在人內皮細胞表面上的ICAM-1和/或E-選擇素的表達增加的方法。該方法可以包括將與人IL-1α特異性結合的純化的mAb添加到包含內皮細胞和IL-1α的混合物中的步驟。

另外，本發(fā)明包括在人受治療者中示蹤炎癥的方法，所述人受治療者之前經受了下列步驟：首次從受治療者獲得外周血單核細胞的第一樣品；用與人IL-1α特異性結合的純化的mAb接觸所述第一樣品；以及確定所述第一樣品中與所述單克隆Ab結合的細胞的百分比。該方法可包括下列步驟：(a)再次從該受治療者獲得外周血單核細胞的第二樣品；(b)使所述第二樣品接觸與人IL-1α特異性結合的純化的mAb；(c)確定所述第二樣品中與所述單克隆Ab結合的細胞的百分比；以及(d)將所述第一樣品中結合所述mAb的細胞的百分比與所述第二樣品中結合所述單克隆Ab的細胞的百分比相比較。

在上述的方法中，純化的mAb可以是包含與輕鏈共價連接的重鏈的人IgG1?mAb，例如，其中所述重鏈包含SEQ?ID?NO：9的氨基酸序列且所述輕鏈包含SEQ?ID?NO：11的氨基酸序列。

本發(fā)明中的另一種方法的特征是下列步驟：(a)使用濾器富集從人受治療者獲得的生物樣品，所述濾器根據分子量將分子分為包含與IL-1α復合的完整IgG的第一級分和包含小于100Kda的分子的第二級分；以及(b)對所述第一級分中的IL-1α的量進行定量。