[發明專利]使用脂肪酶和脂肪酸甘油酯通過溶性鞘脂的酶促N-酰化反應制備鞘脂的方法

有效

• 申請號: 200980121981.2
• 申請日: 2009-05-22
• 公開（公告）號: CN102057050A
• 公開（公告）日: 2011-05-11
• 發明（設計）人: F·霍爾曼;O·圖姆;P·格熱比克;C·特勒
• 申請（專利權）人: 贏創高施米特有限公司
• 主分類號: C12P13/02
• 分類號: C12P13/02;C07H15/00;A61K31/133;A61K8/68
• 代理公司: 永新專利商標代理有限公司 72002
• 代理人: 于輝

1.生物催化制備通式I的鞘脂的方法

所述方法通過在生物催化劑的存在下，所述生物催化劑包括屬于酶分類E.C.3.1.1的至少一種羧酸酯水解酶，使通式II的溶性鞘脂與至少一種羧酸酯反應而進行，

所述羧酸酯選自通式IIIa-e的化合物

其中R¹各自獨立地表示任選地不同的具有2至55個碳原子的直鏈或支化的烷基鏈，任選地包含一個或多個重鍵和/或芳環或雜芳環，任選地插入有氧原子或酯或酰胺官能團且任選地被選自烷基、羥基、酮或胺基團的至少一種其它基團所取代，

R²表示H、磷酸膽堿、乙醇胺、絲氨酸或糖，

X表示CH＝CH、CH₂-CH₂或CH₂-HCOH。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述羧酸酯為至少一種羧酸與甘油的酯，其中所述羧酸選自基于天然植物或動物油的具有6-30個碳原子的天然存在的脂肪酸。

3.如權利要求1或2所述的方法，其特征在于，在所述酶促反應之前，通過溶性鞘脂的酸加成產物的去質子化而制備所述溶性鞘脂。

4.如權利要求3所述的方法，其特征在于，在溶性鞘脂的酸加成產物的去質子化和生物催化制備之間進行過濾步驟。

5.如權利要求1或2所述的方法，其特征在于，在生物催化過程中，通過溶性鞘脂的酸加成產物的去質子化而制備所述溶性鞘脂。

6.如權利要求3-5中的至少一項所述的方法，其特征在于，將溶性鞘脂的羧酸羧酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽、硝酸鹽、碳酸鹽、氫氧化物或鹵化物用作溶性鞘脂的酸加成產物。

7.如權利要求3-6中的至少一項所述的方法，其特征在于，將有機堿或無機堿用于所述的去質子化。

8.如權利要求7所述的方法，其特征在于，使用在質子化之后不會釋出任何水的堿。

9.如權利要求7或8中的至少一項所述的方法，其特征在于，使用堿金屬醇鹽作為堿。

10.如權利要求7-9中的至少一項所述的方法，其特征在于，所述溶性鞘脂的酸加成產物與所述堿的摩爾比為10∶1至0.05∶1。

11.如權利要求1-10之一所述的方法，其特征在于，基于作為前體的通式IIIa-e的羧酸酯的初始質量，偏甘油酯的含量小于2.5％w/w。

12.如權利要求1-11中的至少一項所述的方法，其特征在于，所述羧酸酯水解酶從選自以下的生物體分離：曲霉屬、平臍蠕孢屬、念珠菌屬、鐮孢屬、地絲菌屬、腐質霉屬、小孢子菌屬、毛霉屬、畢赤酵母屬、青霉屬、根霉屬、根毛霉屬、小孢子菌屬、毛霉屬、諾卡氏菌屬、糖酵母屬、鏈霉菌屬、嗜熱絲孢菌、絲孢酵母屬、接合糖酵母屬。

13.如權利要求1-12中的至少一項所述的方法，其特征在于，基于前體的總質量，所用的生物催化劑的量為1％(w/w)至100％(w/w)。

14.如權利要求1-13中的至少一項所述的方法，其特征在于，回收所述生物催化劑。

15.如權利要求1-14中的至少一項所述的方法，其特征在于，在酶促反應開始時，反應物以溶性鞘脂與羧酸酯的摩爾比例為1∶10至10∶1的比例存在。

16.如權利要求1-15中的至少一項所述的方法，其特征在于，所述反應在有機溶劑中進行。

17.如權利要求1-16中的至少一項所述的方法，其特征在于，所述反應在無水條件下進行，無水條件的定義為通過Kar1?Fischer方法測定的水含量不超過0.100M。

18.如權利要求1-17中的至少一項所述的方法，其特征在于，對于各反應物，反應開始時的各反應物濃度為0.01M至3M。

19.如權利要求1至18中的至少一項所述的方法，其特征在于，反應溫度在20℃和130℃之間。

20.如權利要求1-19中的至少一項所述的方法，其特征在于，所述反應在小于1巴的壓力下進行。