[發明專利]蛋白質純化用分離劑和蛋白質純化方法

無效

• 申請號: 200980121965.3
• 申請日: 2009-06-22
• 公開（公告）號: CN102056937A
• 公開（公告）日: 2011-05-11
• 發明（設計）人: 益本誠二;小宮克夫;中村孝司
• 申請（專利權）人: 東曹株式會社
• 主分類號: C07K1/22
• 分類號: C07K1/22;B01J20/22;B01J20/34;C07C211/53;G01N30/88
• 代理公司: 北京林達劉知識產權代理事務所(普通合伙) 11277
• 代理人: 劉新宇;李茂家

1.一種蛋白質純化用分離劑，其特征在于，選自由下述式(1)所示的配體和下述式(2)所示的配體組成的組中的1種或2種以上的配體通過氨基甲酸酯鍵結合到載體上，

上述式(1)中，m表示2～6的整數，

上述式(2)中，R₁和R₂分別獨立地表示氫原子或碳原子數1～4的烷基，n表示1～6的整數。

2.根據權利要求1所述的蛋白質純化用分離劑，其特征在于，式(1)所示的配體用下述式(3)表示，

上述式(3)中，m表示2～4的整數。

3.根據權利要求1或權利要求2所述的蛋白質純化用分離劑，其特征在于，式(2)所示的配體用下述式(4)表示，

上述式(4)中，R₁和R₂分別獨立地表示氫原子或碳原子數1～4的烷基，n表示1～4的整數。

4.根據權利要求1至權利要求3中任一項所述的蛋白質純化用分離劑，其特征在于，載體上的配體的含量為100μmol/ml載體以上。

5.根據權利要求1至權利要求4中任一項所述的蛋白質純化用分離劑，其特征在于，載體是由交聯高分子構成的載體。

6.一種蛋白質純化用分離劑的制造方法，其特征在于，其為制造權利要求1至權利要求5中任一項所述的蛋白質純化用分離劑的方法，

在有機溶劑中使載體與活化劑反應，將載體表面的羥基活化，然后在有機溶劑中使該活化載體與選自由下述式(5)所示的伯胺和下述式(6)所示的伯胺組成的組中的1種或2種以上的胺反應，

上述式(5)中，m表示2～6的整數，

上述式(6)中，R₁和R₂分別獨立地表示氫原子或碳原子數1～4的烷基，n表示1～6的整數。

7.根據權利要求6所述的蛋白質純化用分離劑的制造方法，其特征在于，式(5)所示的伯胺用下述式(7)表示，

上述式(7)中，m表示2～4的整數。

8.根據權利要求6或權利要求7所述的蛋白質純化用分離劑的制造方法，其特征在于，式(6)所示的伯胺用下述式(8)表示，

上述式(8)中，R₁和R₂分別獨立地表示氫原子或碳原子數1～4的烷基，n表示1～4的整數。

9.根據權利要求6至權利要求8中任一項所述的蛋白質純化用分離劑的制造方法，其特征在于，活化劑為羰基二咪唑。

10.一種蛋白質純化方法，其特征在于，將純化目標蛋白質溶解于第一緩沖液中，在使該蛋白質溶液與權利要求1至權利要求5中任一項所述的蛋白質純化用分離劑接觸而吸附蛋白質后，向該分離劑中通入與第一緩沖液pH值不同的第二緩沖液，從而將吸附于該分離劑的蛋白質洗脫。