[發明專利]用于分離和/或純化核酸的裂解、結合和/或洗滌試劑

有效

• 申請號: 200980120902.6
• 申請日: 2009-05-25
• 公開（公告）號: CN102046793A
• 公開（公告）日: 2011-05-04
• 發明（設計）人: R·法比斯;A·霍曼-維施沁斯基;T·沃斯;T·漢斯勒
• 申請（專利權）人: 恰根有限公司
• 主分類號: C12N15/10
• 分類號: C12N15/10
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 陶家蓉;張靜

1.一種裂解、結合和/或洗滌試劑，其包含：

-至少一種離液化合物，

-至少一種緩沖化合物，優選選自：三(羥甲基)氨基甲烷、N-(三(羥甲基)甲基)甘氨酸、N，N-雙(2-羥乙基)甘氨酸、3-(N-嗎啉代)丙磺酸、N-(2-羥乙基)哌嗪-N’-(2-乙磺酸)、哌嗪-1，4-雙(2-乙磺酸)、N-環己基-2-氨基乙磺酸、2-(N-嗎啉代)乙磺酸和/或磷酸鹽緩沖劑，和

-至少一種基于聚氧乙烯的非離子型表面活性劑，選自聚氧乙烯脂肪醇醚、聚氧乙烯烷基苯基醚和/或聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物，以所述試劑的總體積計，其用量從≥8％重量/體積到≤50％重量/體積。

2.如權利要求1所述的裂解、結合和/或洗滌試劑，其特征在于，所述聚氧乙烯脂肪醇醚包含具有6-22個碳原子的脂肪醇部分和具有2-150個(CH₂CH₂O)單元的聚氧乙烯部分，其中，所述聚氧乙烯脂肪醇醚優選選自：聚氧乙烯月桂基醚、聚氧乙烯鯨蠟基醚、聚氧乙烯硬脂基醚和/或聚氧乙烯油基醚。

3.如權利要求1或2所述的裂解、結合和/或洗滌試劑，其特征在于，所述聚氧乙烯脂肪醇醚不是聚氧乙烯月桂基醚。

4.如前述權利要求中任一項所述的裂解、結合和/或洗滌試劑，其特征在于，所述聚氧乙烯烷基苯基醚選自：聚氧乙烯壬基苯基醚和/或聚氧乙烯異辛基苯基醚。

5.如前述權利要求中任一項所述的裂解、結合和/或洗滌試劑，其特征在于，所述裂解、結合和/或洗滌試劑包含非離子型表面活性劑，以所述試劑的總體積計，其用量從≥9％重量/體積至≤40％重量/體積，優選≥10％重量/體積至≤30％重量/體積，優選≥15％重量/體積至≤20％重量/體積。

6.如前述權利要求中任一項所述裂解、結合和/或洗滌試劑，其特征在于，所述離液化合物是鈉鹽或胍鹽，優選選自：碘化鈉、高氯酸鈉、鹽酸胍、硫氰酸胍、異硫氰酸胍和/或其中兩種或更多種鹽的混合物。

7.如前述權利要求中任一項所述的裂解、結合和/或洗滌試劑，其特征在于，所述結合試劑包含支化或非支化的鏈烷醇，優選具有1-5個碳原子的支化或非支化的醇，優選選自：甲醇、乙醇、異丙醇、正丙醇、正丁醇、支化或非支化丁醇或戊醇和/或它們的混合物。

8.如前述權利要求中任一項所述的裂解、結合和/或洗滌試劑在分離和/或純化核酸中的應用。

9.一種從含核酸的生物樣品分離和/或純化核酸的方法，所述方法包括以下步驟：

a)裂解生物樣品，

b)在離液化合物和/或支化或非支化鏈烷醇的存在下，將釋放的核酸固定到基于一種或多種氧化硅化合物的基質上，

c)任選地洗滌固定在基質上的核酸，

d)任選地去除結合的核酸，

其中，裂解和/或固定在包含以下組分的裂解和/或結合組合物存在下進行：

-至少一種離液化合物，和

-至少一種基于聚氧乙烯的非離子型表面活性劑，選自聚氧乙烯脂肪醇醚、聚氧乙烯烷基苯基醚和/或聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物，以組合物的總體積計，用量從≥0.1％重量/體積至≤50％重量/體積。

10.如權利要求9所述的方法，其特征在于，所述聚氧乙烯脂肪醇醚包括具有6-22個碳原子的脂肪醇部分和具有2-150個(CH₂CH₂O)單元的聚氧乙烯部分，其中，所述聚氧乙烯脂肪醇醚優選選自：聚氧乙烯月桂基醚、聚氧乙烯鯨蠟基醚、聚氧乙烯硬脂基醚和/或聚氧乙烯油基醚。

11.如權利要求9或10所述的方法，其特征在于，所述聚氧乙烯脂肪醇醚不是聚氧乙烯月桂基醚。

12.如前述權利要求中任一項所述的方法，其特征在于，所述裂解和/或結合組合物包含非離子型表面活性劑，以所述組合物的總體積計，其用量從≥0.2％重量/體積至≤30％重量/體積，優選≥3％重量/體積至≤10％重量/體積，優選≥3.2％重量/體積至≤8％重量/體積。

13.一種從含核酸的生物樣品分離和/或純化核酸的試劑盒，該試劑盒包含如權利要求1-7中任一項所述的裂解、結合和/或洗滌試劑。