[發明專利]減少細菌中接合型質粒

無效

• 申請號: 200980116840.1
• 申請日: 2009-03-10
• 公開（公告）號: CN102027107A
• 公開（公告）日: 2011-04-20
• 發明（設計）人: C·B·阿巴艾亞;賈亞希拉·馬努爾;巴拉希·西瑞蘭姆
• 申請（專利權）人: 岡戈根股份有限公司
• 主分類號: C12N7/00
• 分類號: C12N7/00;A61K35/76;C12N15/63
• 代理公司: 北京英賽嘉華知識產權代理有限責任公司 11204
• 代理人: 王達佐;洪欣

1.減少編碼連接到噬菌體受體的抗生素或毒力標記的質粒流行的方法，所述質粒攜帶于異質細菌培養物中的細胞內，所述方法包括：

a)使所述細菌培養物與足夠的能夠與所述受體結合的噬菌體受體特異性殺死劑接觸，

其中所述接觸允許所述受體特異性殺死劑與所述噬菌體受體結合并殺死含有所述接合型質粒的宿主細菌，從而減少異質細菌培養物內編碼所述抗生素或毒力因子的接合型質粒的流行。

2.如權利要求1所述的方法，其中所述流行的減少是：

a)所述細菌培養物中所述接合型質粒的絕對數量的減少；或

b)每個所述細菌培養物的成員的所述接合型質粒數量的減少。

3.如權利要求1所述的方法，其中所述流行的減少為至少2倍。

4.如權利要求1所述的方法，其中所述細菌培養物是：

a)處于對數生長階段；

b)處于穩定狀態生長階段；

c)乳酸桿菌或乳制品加工培養物；

d)在水處理設施中；

e)在真核細胞或器官培養物中；

f)在真核宿主中；

g)在脊椎生物體中或脊椎生物體上；或

h)在哺乳動物中或哺乳動物上。

5.如權利要求1所述的方法，其中所述噬菌體受體特異性殺死劑是：

a)復層病毒(tectivirus)；

b)寬宿主范圍的含有脂質的噬菌體；

c)PRD1噬菌體群的成員；

d)質粒依賴性寬宿主范圍噬菌體；

e)復層噬菌體科(tectiviridae)；

f)以二十面體形態、脂質包含物、55-65nm直徑頭部和12-130nm尾部中的至少一個或多個為特征的噬菌體；

g)選自命名為PRD1、PRR1、PR3、PR4、PR5、L17、PR772、GIL01、pGIL01、BAM35或GIL16的噬菌體。

6.如權利要求1所述的方法，還包括以下步驟：將所述細菌培養物暴露于提供至少一個編碼所述受體的所述接合型質粒從所述細菌培養物的供體成員到接受體成員的轉移的交配對形成系統(mating?pairformation?system)，并且允許所述系統實現所述接合型質粒從所述細菌培養物的所述供體成員到所述接受體成員的轉移，從而產生包含所述接合型質粒并表達所述噬菌體受體的宿主細菌。

7.如權利要求6所述的方法，其中所述接合型質粒：

a)選自不相容性群N、P或W質粒；

b)編碼在所述噬菌體復制中重要的一個或多個其他基因；

c)編碼一個或多個抗生素抗性或毒力標記；

d)是以與所述成員的染色體分離的DNA的形式；或

e)編碼一個或多個菌毛基因。

8.如權利要求6所述的方法，其中所述交配對形成系統包含：

a)至少一個菌毛接合基因；

b)另一可移動元件轉移系統。

9.如權利要求6所述的方法，其中所述：

a)允許是在至少30℃的溫度下；

b)允許是在其中多個菌毛基因被表達的溫度下；

c)實現是至少2小時的時間段；

d)供體是F+細菌細胞；

e)接受體是F-細菌細胞；

f)允許導致包含所述接合型質粒的所述細菌培養物的成員的增加；

g)供體是非致病性細菌菌株；或

h)供體和接受體的比例在1∶1的兩個對數單位內。

10.如權利要求6所述的方法，其中所述接觸是與：

a)對于每個包含所述編碼所述受體的接合型質粒的細菌細胞至少10個噬菌體；

b)能夠減少所述接合型質粒數量的噬菌體；

c)不能在包含所述質粒的所述成員中復制的噬菌體；或

d)不能在包含所述接合型質粒的所述培養物的成員中復制其核酸的噬菌體。