[發明專利]芘攜帶肽穿過血腦屏障的用途

無效

• 申請號: 200980116666.0
• 申請日: 2009-01-30
• 公開（公告）號: CN102014967A
• 公開（公告）日: 2011-04-13
• 發明（設計）人: 雷內·韋格爾津;安德魯·紐伯格;D·羅克珊·杜安;艾倫·魯道夫
• 申請（專利權）人: 阿德利夫股份有限公司
• 主分類號: A61K47/48
• 分類號: A61K47/48;A61K49/00;A61P25/00;A61P25/28
• 代理公司: 北京市柳沈律師事務所 11105
• 代理人: 張文輝

相關申請

本申請要求2008年3月21日提交的美國臨時申請61/038,634的優先權的權益，本文通過提及而完整收錄全部內容。

發明領域

一般而言，本發明涉及穿過血腦屏障(BBB)投遞肽、蛋白質和抗體的領域。更具體而言，本發明涉及使用芘-制劑偶聯物(agent?conjugate)來穿過BBB投遞肽、蛋白質或抗體的方法。

發明背景

神經病癥的檢測和治療由于內源和外源施用的成分對腦的不透性(由于血腦屏障(BBB))而常常是困難的。BBB有效地將腦與周圍制劑，諸如肽、蛋白質、大的大分子、非肽性分子、離子、和水溶性非電解質分開。例如，一般公認帶電荷的或親水性的分子以及具有大于約700kDa分子量的分子不能穿過BBB。一般還公認肽，諸如約21個氨基酸殘基的肽不能有效穿過BBB，較長的肽諸如40個殘基的Aβ40蛋白和42個殘基的Aβ42蛋白(兩者均與阿耳茨海默氏病(Alzheimer’s?disease)有關)也不能。如此，BBB阻止檢測劑以及治療劑(其在其它方面可用于診斷和治療多種神經病學病癥)的投遞。

在將制劑有效轉運至腦上的先前嘗試已經包括將制劑偶聯至載體模塊，使用脂質體配制劑、和使用納米顆粒。例示性載體模塊包括天然存在的多胺(美國專利5,670,477)、載體諸如溶菌酶、血紅蛋白、細胞色素-c和物質-P(美國專利5,604,198)、和糖類(美國專利5,260,308)。在將Aβ蛋白有效轉運到腦上的先前嘗試已經使用與載體諸如OX26或腐胺偶聯的Aβ40或更小的片段，諸如Aβ1-30。還已經提出高度糖基化終產物(RAGE)的受體用于介導穿過BBB的轉運，特別對于Aβ蛋白。

然而，仍需要用于穿過BBB投遞肽制劑(包括肽、蛋白質和抗體)的方法、制劑和試劑盒。

發明概述

根據一個實施方案，本發明提供了一種用于穿過血腦屏降投遞肽偶聯物的方法，包括對受試者施用偶聯物，其包含肽制劑和芘。在一些實施方案中，所述肽制劑是能夠鑒定與神經病學病癥有關的蛋白質或結構的檢測劑。在另一個實施方案中，所述肽制劑是可用于治療神經病癥的治療劑。在一些實施方案中，所述肽制劑包括與靶蛋白中經歷從α-螺旋構象向β-片層構象的構象變化的區域對應的氨基酸序列，但是不包括所述靶蛋白的全長序列。在其它實施方案中，所述肽制劑是對與神經病癥有關的蛋白質或結構特異性的抗體。在一個實施方案中，所述偶聯物進一步包含可檢測標記物。在另一個實施方案中，所述偶聯物包含芘衍生物，諸如烷基化的芘類似物、芘丁酸鹽(酯)、PEG化的芘、芘-清蛋白類似物、包含游離羧基的芘衍生物和包含游離氨基的芘衍生物。在一些實施方案中，所述偶聯物包含兩個或更多個芘模塊(moieties)。

根據另一個實施方案，本發明提供了一種體內檢測方法，包括對受試者施用包含肽檢測劑和芘的偶聯物，并檢測位于受試者的腦中的偶聯物。在一個實施方案中，所述檢測劑能夠鑒定與神經病癥有關的蛋白質或結構。在一些實施方案中，所述偶聯物包含兩個或更多個芘模塊。在一些實施方案中，至少一種芘模塊是包含游離羧基的芘衍生物，而至少一種芘模塊是包含游離氨基的芘衍生物。在一個實施方案中，所述芘至少在肽的N端或C端，或在肽的N和C端兩者與肽檢測劑偶聯。在又一個實施方案中，所述檢測劑能夠鑒定處于自我聚集的特定構象或狀態的蛋白質。在另一個實施方案中，定位的偶聯物的檢測牽涉檢測芘激基締合物(excimers)。

在又一個實施方案中，本發明提供了一種體內檢測方法，包括對受試者施用包含肽檢測劑、芘和可檢測標記物的偶聯物，并檢測已經位于所述受試者的腦中的偶聯物。在一些實施方案中，所述標記物是熒光團、MRI造影劑、離子發射體、和放射性標志物。

在其它實施方案中，本發明提供了一種用于治療神經病癥的方法。該方法包括對受試者施用治療有效量的偶聯物，其包含肽治療劑和芘。在一個實施方案中，所述肽制劑是抗淀粉樣劑(anti-amyloid?agent)。

附圖簡述

圖1顯示了通過對轉基因小鼠鼻內施用的媒介物、肽-制劑芘偶聯物、或芘丁酸鹽(酯)(pyrene?butyrate)每mm²檢測的Aβ斑數目。

圖2顯示了通過鼻內施用的偶聯物(AD185)熒光(-)對硫黃素S染色(▲)在皮層中檢測的Aβ斑之間的相關性。

圖3顯示了通過靜脈內施用的偶聯物(AD185)熒光(-)對硫黃素S染色(■)在皮層(圖3A)和海馬(圖3B)中檢測的Aβ斑之間的相關性。

發明詳述